薄层层析中如果板点样处损坏,会有什么影响
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如果板点样处损坏的主要影响因素
一、样品的预处理及供试液的制备
样品供试液净化的方法
1单一溶剂萃取法
2分段萃取法
3液液萃取法
4固液萃取法:氧化铝小柱、聚酰胺小柱、硅烷化硅胶小柱等
二、薄层色谱的上样技术
1要求原点<3mm,否则分离数SN太大。
2溶解样品的溶剂具有洗脱能力,样品在原点位置环形展开——“上样环形色谱效应”
3供试液溶剂在原点的残留——改变展开的选择性
4上样时对薄层板的机械损坏
三、吸附剂活性与相对湿度对薄层色谱的影响
相对湿度的控制方法
1有的种类要求不严格:30%~70%即可。但为了实验具有良好的重现性,应记录实验时的相对湿度。
2控制方法:将双层展开槽中的一侧加入一定浓度的硫酸,将点好样的薄层板放入另一侧槽中,密闭15~30分钟后,再加入展开剂展开。
四、溶剂燕气在薄层色谱中的作用
薄层色谱与柱色谱的区别之一就是溶剂的蒸气相在展开箱中也参与色谱展开而形成三维的层析过程。展开箱的气体空间在层析过程中起着重要的作用。通常所谓的“展开箱饱和”应该严格区分以下几种情况:
(1)展开箱饱和;是指展开前及展开中溶剂系统中所有组分在展开箱的整个气体空间达到
平衡,即达到饱和状态;但在日常的实践中,较少需要在“饱和”状态下展开,而只需用展开剂(或规定的溶剂)的蒸气在展开箱中预平衡一定的时间,即“预平衡”。
(2)预吸附:通常是指薄层板的干燥板面(即未被溶剂湿润的部分)对展开箱中气体分子的任
何程度的吸附,即通常所谓的“预饱和”。
(3)吸附饱和:是指薄层板的未被溶剂湿润的部分与展开箱的饱和气体空间达到平衡状态,
即“完全饱和”,这是预吸附的极限状态。
(4)毛细管饱和:是指薄层板所有的自由空隙借毛细管的作用被溶剂充满的过程,即相当
于展外完成后的状态。
一、样品的预处理及供试液的制备
样品供试液净化的方法
1单一溶剂萃取法
2分段萃取法
3液液萃取法
4固液萃取法:氧化铝小柱、聚酰胺小柱、硅烷化硅胶小柱等
二、薄层色谱的上样技术
1要求原点<3mm,否则分离数SN太大。
2溶解样品的溶剂具有洗脱能力,样品在原点位置环形展开——“上样环形色谱效应”
3供试液溶剂在原点的残留——改变展开的选择性
4上样时对薄层板的机械损坏
三、吸附剂活性与相对湿度对薄层色谱的影响
相对湿度的控制方法
1有的种类要求不严格:30%~70%即可。但为了实验具有良好的重现性,应记录实验时的相对湿度。
2控制方法:将双层展开槽中的一侧加入一定浓度的硫酸,将点好样的薄层板放入另一侧槽中,密闭15~30分钟后,再加入展开剂展开。
四、溶剂燕气在薄层色谱中的作用
薄层色谱与柱色谱的区别之一就是溶剂的蒸气相在展开箱中也参与色谱展开而形成三维的层析过程。展开箱的气体空间在层析过程中起着重要的作用。通常所谓的“展开箱饱和”应该严格区分以下几种情况:
(1)展开箱饱和;是指展开前及展开中溶剂系统中所有组分在展开箱的整个气体空间达到
平衡,即达到饱和状态;但在日常的实践中,较少需要在“饱和”状态下展开,而只需用展开剂(或规定的溶剂)的蒸气在展开箱中预平衡一定的时间,即“预平衡”。
(2)预吸附:通常是指薄层板的干燥板面(即未被溶剂湿润的部分)对展开箱中气体分子的任
何程度的吸附,即通常所谓的“预饱和”。
(3)吸附饱和:是指薄层板的未被溶剂湿润的部分与展开箱的饱和气体空间达到平衡状态,
即“完全饱和”,这是预吸附的极限状态。
(4)毛细管饱和:是指薄层板所有的自由空隙借毛细管的作用被溶剂充满的过程,即相当
于展外完成后的状态。
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