高效液相色谱法对测试样品有什么要求
含量=[(浓度X稀释倍数)/供试品称样量]X100%
首先确定样品成分,获取该成分的纯品(对照品),将对照品溶液配制成与样品成分浓度相当的浓度(比如样品浓度是10mg/ml左右,对照品溶液就配制成10mg/ml)。
对照品溶液和供试品溶液分别进样,进行色谱分析,获得对照品成分峰面积与供试品溶液峰面积
此时已知对照溶液峰面积,对照溶液浓度,求供试品溶液浓度,因为成分在液相中响应值不变,故对照品溶液浓度/对照品溶液峰面积=F(即响应因子)=供试品溶液浓度/供试品溶液峰面积,求得供试品溶液浓度。
高效液相色谱法有“四高一广”的特点:
1、高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。
2、高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。
3、高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
4、高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。
5、应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。
2024-08-26 广告
样品在进行检测前还要配制成一定浓度的溶液(配制溶液的时候需根据样品的溶解度情况选择合适的溶剂,为了减小溶剂峰,通常使用流动相作为溶剂,样品溶液的浓度一般配制成10ug/ml左右的就可以),如果样品溶解很好且没有其他杂质,可直接吸取样品溶液进样,如果样品中还有其他成分,比如测定口服药物制剂中某成分的含量,往往口服药物制剂中有其他辅料,样品溶液在进样前还要进行一下过滤(通常采用0.22um或0.45um的针头式过滤器)。
2012-02-15
谢谢!还有其他的要求吗?
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