Question

ELISA直接法和间接法优缺点

我做的是间接ELISA测小分子抗原，上届的学长做的是直接法测相同的抗原， 要是答辩老师问起创新性或者和他们的区别，我不知道怎么回答。 谢谢。

Answer 1

直接法（direct ELISA）
将抗原直接固定在固相载体上，加入酶标记的一级抗体，即可测定抗原总量，此一级抗体的特异性非常重要。
优势：操作手续简短，因无须使用二抗可避免交互反应。
缺点：试验中的一抗都得用酶标记，但不是每种抗体都适合做标记，费用相对提高。

间接法（indirect ELISA）
此测定方法与直接法类似，差别在于一级抗体没有酶标记，改用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。
优势：二抗可以加强信号，而且有多种选择能做不同的测定分析。不加酶标记的一级抗体则能保留它最多的免疫反应性。
缺点：交互反应发生的机率较高。