Question

高中生物 急急急

科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstI、 SmaI、 HindIII
、 Alul等四种限制酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），其中①——④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，I、II表示相关结构或细胞。请据图作答：

（1）在构建基因表达载体时，可用一种或者多种限制酶进行切割。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用限制酶，分别对
进行切割，切割后产生的DNA片段分别为
http://sq.k12.com.cn/discuz/thread-576431-1-1.html

Answer 1

1：用sma和pst切割,这样切下来的鱼抗冻蛋白基因左侧是SmaI的切口，右侧是PstI的切口，因为他们切出的粘性末端不同，这样切出的目的基因（鱼抗冻蛋白基因）不会发生自生环化现象，质粒的处理同上。
2：用相同的限制酶同时处理目的基因所在DNA和质粒DNA，这样他们的粘性末端才能互补配对，在DNA连接酶的催化下，构建成基因表达载体（重组质粒）。

Answer 2

学习了！！

追问

关键就是 基因不会自然环化了哈