离子交换层析的原理是什么? 已解决
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离子交换层析法
是从复杂的混合物中,分离性质相似大分子的方法之一,依据的原理是物质的
酸碱性
,极性,所带阴阳离子的不同。电荷不同的物质,对管柱上的
离子交换剂
有不同的亲和力,改变冲洗液的
离子强度
和pH值,物质就能依次从
层析柱
中分离出来。
层析开始前,功能基团与
反离子
稳定结合,就与反离子发生可逆交换,与层析剂结合被固定下来。因为盐离子可以与底物竞争功能基团,盐浓度越高样品与层析剂结合越不紧密,易被洗脱下来。不同物质与层析剂结合程度不同,洗脱下来的时间不同,因此得以分开。
扩展资料
离子交换剂的选择首重保持欲分离物质的生物活性,以及在不同pH值环境中,此物质所带的电荷和电性强弱,阴
阳离子交换剂
的选择若被分离物质带
正电荷
,这些
碱性蛋白质
,它们在酸性溶液中较稳定,亲和力强,故采用阳离子交换剂。
在碱性溶液中较稳定,则使用
阴离子交换剂
,如果欲分离的物质是
两性离子
,一般考虑在它稳定的pH范围带有何种电荷,作为交换剂的选择。离子交换剂的再生与保存离子交换剂可在柱上再生,若有
脂溶性
物质则可用非离子型
去污剂
洗柱后再生,也可用乙醇洗涤。
参考资料来源;
百度百科
--离子交换层析
是从复杂的混合物中,分离性质相似大分子的方法之一,依据的原理是物质的
酸碱性
,极性,所带阴阳离子的不同。电荷不同的物质,对管柱上的
离子交换剂
有不同的亲和力,改变冲洗液的
离子强度
和pH值,物质就能依次从
层析柱
中分离出来。
层析开始前,功能基团与
反离子
稳定结合,就与反离子发生可逆交换,与层析剂结合被固定下来。因为盐离子可以与底物竞争功能基团,盐浓度越高样品与层析剂结合越不紧密,易被洗脱下来。不同物质与层析剂结合程度不同,洗脱下来的时间不同,因此得以分开。
扩展资料
离子交换剂的选择首重保持欲分离物质的生物活性,以及在不同pH值环境中,此物质所带的电荷和电性强弱,阴
阳离子交换剂
的选择若被分离物质带
正电荷
,这些
碱性蛋白质
,它们在酸性溶液中较稳定,亲和力强,故采用阳离子交换剂。
在碱性溶液中较稳定,则使用
阴离子交换剂
,如果欲分离的物质是
两性离子
,一般考虑在它稳定的pH范围带有何种电荷,作为交换剂的选择。离子交换剂的再生与保存离子交换剂可在柱上再生,若有
脂溶性
物质则可用非离子型
去污剂
洗柱后再生,也可用乙醇洗涤。
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--离子交换层析
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利穗科技
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