Question

细胞培养获得成功的关键要素是什么?

Answer 1

外泌体多数情况下，细胞在体外培养需要血清，但血清中含有外泌体，为了避免血清污染细胞产生的外泌体，一般采用2种方法：①细胞培养前，通过100000??g超速离心过夜，去除血清外泌体。②可选择无血清培养基进行培养。宇玫博生物正在免费提供外泌体提取试剂盒，数量有限，先申请先得。

Answer 2

1.要保证无菌，包括无菌操作，无菌环境。枪头等要及时灭菌，培养瓶，移液管最好使用一次性的，如果你的细胞比较不好养，最好使用一次性的。
2.要传代的时候细胞传代的数量不能太少，否则细胞不容易养活。另外，传代不要过度频繁，即使是肿瘤细胞。
3.不要经常用胰酶消化细胞，且消化时间不要过长。
4.根据细胞生长情况，即使更换新鲜培养基。
5.血清一般要冻存在-20摄氏度，用的时候在4摄氏度融化，不要反复冻存，最好用10ml的离心管分装使用。

Answer 3

关键是保证无菌条件，还有一定的营养、适宜的温度等

Answer 4

1.了解所培养细胞的生长周期；
2 细心加实验条件允许
3 培养细胞不能急功近利，也不要想当然。需要有备份的条件下去尝试新的培养方式，否则实验失败了细胞株也没了。实验记录详细完整也是很关键的