怎么鉴别蜂王浆的品质
2019-03-01 · 农业农村部直属的大型综合出版社
国家规定蜂王浆分为优等品、一等品、合格品三个等级。检验方法分为感官检验和理化检验两个方面,蜂王浆质量标准见表8。
表8 蜂王浆质量标准
表8 蜂王浆质量标准(续)-1
(1)感官检验
凭蜂王浆的颜色、状态、气味、滋味,用目测、口尝、鼻嗅等方法检验。
①水分测定——减压加热干燥法:
主要仪器:减压干燥箱、称量瓶、干燥器、万分之一天平。
测定步骤:精确称取蜂王浆试样1~2克,置于已恒重的称量瓶中,放入干燥箱,在温度为75℃,压力为-0.097~-1.00兆帕斯卡,干燥至恒重,取出称量瓶,置于干燥器中,冷却30分钟后称重。以下列公式计算:
式中 W1——称量瓶和样品的重量(克);
W2——称量瓶和样品干燥至恒重的重量(克);
W3——称量瓶的重量(克)。
平行试验允许误差不超过0.5%,取平均值确定结果。
②粗蛋白测定——凯氏定氮法:
主要仪器:凯氏烧瓶、半微量法蒸馏装置一套、滴定装置一套、万分之一天平。
试剂:
浓硫酸(分析纯)。
硫酸铜与硫酸钾混合剂:称取硫酸铜(化学纯)1克,硫酸钾(化学纯)10克,置于研钵中混合均匀,研细备用。
混合指示剂:量取0.1%甲基红乙醇溶液2份,0.1%溴甲酚绿乙醇溶液3份,临用时混合。
2%硼酸吸收液:称取硼酸(化学纯)2克,量取混合指示剂2毫升,乙醇20毫升于锥形瓶中,加蒸馏水至100毫升,混合均匀,备用。
40%氢氧化钠溶液。
稀硫酸:量取浓硫酸5.7毫升,加蒸馏水稀释至100毫升。
0.1摩尔/升盐酸标准溶液的配制与标定:
配制:量取浓硫酸(分析纯)溶液9毫升,加蒸馏水稀释至1000毫升,摇匀备用。
标定:精确称取在270~300℃干燥至恒重的基准无水碳酸钠约0.15克,置于150毫升锥形瓶中,加入蒸馏水50毫升,使其溶解,再加入甲基红、溴甲酚绿混合指示剂(按粗蛋白项配制)10滴,用盐酸溶液滴定至溶液由绿色转变为紫红色时,煮沸2分钟,冷却至室温,继续滴定至溶液由绿色变为暗紫色为终点。以下式计算:
M=W/V×0.106
式中 M——盐酸溶液的摩尔浓度;
V——滴定消耗盐酸溶液的量(毫升);
W——无水碳酸钠的重量(克)。
测定步骤:
消化:精确称取蜂王浆约1克,放入干燥的50毫升凯氏烧瓶中,加入硫酸钾混合剂2克,再沿瓶壁缓缓加入浓硫酸61毫升,充分混合,在瓶口放一小漏斗,使烧瓶成45度斜置,开始用弱火缓缓加热,使溶液温度保持在沸点以下,等泡沸停止后,逐步加大火力,沸腾至溶液成澄明的绿色后,再继续加热30分钟,放冷备用。
蒸馏:量取2%硼酸溶液10毫升,置100毫升锥形瓶中,加入混合指示剂2滴和少量的稀硫酸,将冷凝管尖端浸入液面下,而后将凯氏烧瓶中内容物经由漏斗移入蒸馏瓶中,用少量蒸馏水淋洗凯氏烧瓶及漏斗数次,再加入40%氢氧化钠溶液25毫升,用少量蒸馏水再洗漏斗数次,关闭橡皮管夹,加热圆底烧瓶进行蒸气蒸馏,当硼酸液开始由酒红色变为蓝绿色时起,继续蒸馏10分钟后,将冷凝管尖端提出液面,使蒸气继续冲洗1分钟,用少量蒸馏水淋洗尖端后,停止蒸馏。
滴定:将吸收液用0.01摩尔/升盐酸标准溶液滴定至由蓝绿色变为灰紫色为终点,并用空白试验校正。以下式计算:
粗蛋白(%)=(V1-V2)×M×0.014/W×D×6.25×100
式中 V1——样品消耗0.01摩尔/升盐酸标准溶液毫升数;
V2——空白试验消耗0.01摩尔/升盐酸标准溶液毫升数;
M——盐酸标准溶液的摩尔浓度;
0.014——1毫升1摩尔/升盐酸标准溶液相当于氮的克数;
W——样品的重量(克);
D——样品的稀释倍数;
6.25——氮换算成蛋白质的系数。
平行试验允许误差不超过±0.2%,取平均值确定结果。
③酸度测定——电位滴定法:
主要仪器:电位滴定计、滴定管、烧杯、万分之一天平。
试剂:0.1摩尔/升氢氧化钠标准溶液。
标定:精确称取105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约0.6克,置于150毫升锥形瓶中,加新沸过冷却的蒸馏水50毫升,振摇使其溶解,加入酚酞指示剂2滴,用氢氧化钠溶液缓缓滴定至溶液显粉红色为终点,按下列公式计算:
M=W/V×0.2042
式中M——氢氧化钠溶液的摩尔浓度;
V——滴定消耗氢氧化钠溶液的量(毫升);
W——邻苯二甲酸氢钾的重量(克)。
测定步骤:精确称取蜂王浆试样约1.2克,置于100毫升烧杯中,加入新沸过已冷却的蒸馏水75毫升,用0.1摩尔/升氢氧化钠标准溶液滴定至pH为8.3,并在1分钟内不变色为终点,以下式计算:
酸度=V/W×10
式中 V——滴定试样所消耗的0.1摩尔/升氢氧化钠标准溶液毫升数;
W——试样重量(克)。
平行试验允许误差不超过±0.5毫升,取平均值确定结果。
④10-羟基-2-癸烯酸(10-HDA)的测定:
仪器:VIS911A紫外可见分光光度计。
试剂:甲醇(分析纯)、10-HDA标准品。
标准溶液配制:精确称取10-HDA标准品12.5毫克,用甲醇溶解并定容于250毫升的容量瓶中。
检样制备:精确称取蜂王浆100~200毫克,用甲醇溶解并定容于100毫升容量瓶中,用干燥漏斗将溶液过滤于预先干燥的150毫升的带塞三角瓶中,分别吸取1.0毫升,用甲醇稀释至10.0毫升,备用。
测定步骤:标准曲线绘制:精确吸取标准液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0毫升分别置于25毫升容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,以甲醇为空白对照,用1厘米厚石英池在205±1纳米处测每个浓度的吸光度,并绘制标准曲线。
样品检测:用上述同样方法测定样品的吸光度,然后从标准曲线上查出相应浓度并按下式换算出重量的百分比。
10-HDA(%)=C×稀释倍数×100/W×1000×100%
式中 C——由标准曲线上求得的10-HDA的样品浓度(微克/毫升);
W——样品重(毫克)。
⑤淀粉测定(定性分析):
试剂:1.3%碘液:称取碘1.3克,碘化钾3.6克,置于200毫升烧杯中,加蒸馏水30毫升,再加盐酸1滴,溶解后加蒸馏水至100毫升,摇匀,置棕色瓶中备用。
测定步骤:称取蜂王浆约0.2克,置于50毫升烧杯中,加入蒸馏水10毫升,加热煮沸,冷却至室温,加入1.3%碘液数滴,不得显蓝色。若显蓝色则证明蜂王浆中掺有淀粉。
⑥总糖测定——斐林氏法:
试剂:
斐林氏A液:精确称取结晶硫酸铜(CuSO4·5H2O,分析纯)34.64克,先用少量蒸馏水溶解,再用蒸馏水稀释至500毫升,摇匀过滤后,备用。
斐林氏B液,精确称取酒石酸钾钠(C4H4KNaO6·4H2O,分析纯)173克和氢氧化钠50克,先用少量蒸馏水溶解,再用蒸馏水稀释至500毫升,摇匀,2天后备用。
标定:精确吸取斐林氏A及B溶液各5毫升,置于150毫升锥形瓶中,加蒸馏水10毫升,置于电炉石棉网上加热至沸腾,用0.5%无水葡萄糖液趁热滴定至蓝色即将褪尽,加入次早基蓝指示剂2滴,继续加热至沸腾,趁热继续滴定至蓝色消失为终点。按下式计算:
T=W×V1/V2
式中 T——10毫升斐林氏试液相当于葡萄糖的重量(克);
W——无水葡萄糖的称取重量(克);
V1——滴定消耗无水葡萄糖溶液的毫升数;V2——无水葡萄糖定容的毫升数。
0.5%葡萄糖溶液。
次甲基蓝指示剂:精确称取次甲基蓝0.1克,加蒸馏水溶解并稀释至100毫升,贮于棕色瓶中。
浓盐酸(分析纯)。
28%氢氧化钠溶液。
蜂王浆试样溶液制备:精确称取蜂王浆试样约3克,置于100毫升容量瓶中,加入蒸馏水50毫升,再加入浓盐酸5毫升,置水浴锅中在68~70℃下水解10分钟迅速冷却至室温,用28%氢氧化钠溶液中和至pH6~8,加蒸馏水稀释至刻度,摇匀,过滤后备用。
测定步骤:精确吸取斐林氏A液及B液各5毫升,置250毫升锥形瓶中,加蒸馏水10毫升,置电炉上加热至沸腾,用蜂王浆试样溶液趁热滴定至蓝色即将消失,加入次甲基蓝指示剂两滴,再加热煮沸,趁热继续滴定至蓝色消失为终点。
计算公式:
式中M——试样重量(克);
V——滴定时消耗蜂王浆试样溶液毫升数;
T——10毫升斐林氏试液相当于葡萄糖克数。
平行试验允许误差不超过±0.2%。取平均值确定结果。
1、气味:真蜂王浆,微带花香味。无香味者是假货。如有发酵味并有气泡,说明蜂王浆已发酵变质,如蜂王浆有哈喇味,说明酸败。如加入奶粉、玉米粉、麦乳精等,则有奶味或无味。如加入淀粉,用碘试验会呈蓝色。
2、色泽:真蜂王浆,呈乳白色或淡黄色,有光泽感,无幼虫,蜡屑、气泡等,如果色泽苍白或特别光亮,说明蜂王浆中掺有牛奶、蜂蜜等。如果色泽变深,有小气泡,主要是由于贮存不善,久置空气中,产生质量腐败变质现象。无光泽的蜂王浆,则为次品。
3、稠度:真蜂王浆,稠度适中,呈稀奶油状。如果稠度稀,说明其中水分多,或掺有假;如果稠度浓,说明采浆时间太晚或贮藏不当。
优质蜂王浆的特征:首先,取少许蜂王浆放入一无色透明的玻璃管中,呈乳白色或淡黄色且整体颜色一致是首要特征。其次,可以观察到浆中有胶状粒子物,且有一定光泽,粘稠度呈稀奶油状。再次,闻之有特殊的清香气味,口味上酸、涩、微甜、辛辣均有,但都不过头。太酸可能变质,太甜可能掺蜜或糖,涩味不足可能掺假。纯品加碘液试验,呈红棕色。
劣质蜂王浆的特征:颜色深重且灰暗,稠度过稀过稠,有的浆体呈气泡状态,浆面上无朵状 (不包括抽吸的蜂王浆),用手捏一下,感觉粗糙,粘手,闻之有臭味或腐败气味,口味太酸 、太甜或过涩。
掺假蜂王浆
(1) 糊精、合成浆精的检出:用筷子插入浆中,拉出后形成丝体,显得粘稠,纯蜂王浆不易形成丝体。
(2) 花粉球、玉米面的检出:用手捏能感到有坚硬的块状物,把这些颗粒放在一玻璃片上, 在酒精上灯烤一下,不会溶化,表明是掺兑了类似花粉球、玉米面的物质。
(3) 蜂蜜、蔗糖的检出:
取少许放在舌面上品尝,能明显感到甜味。用化学方法测定含糖量也可以表明有低级糖类化 合物类物质掺入。正常蜂王浆中含还原糖为20%。
(4) 乳制品的检出:取少许蜂王浆,加适量水煮沸,冷却后加入少量食盐,即刻出现絮状沉 淀物,表明有乳制品。
(5) 淀粉的检出:放一点醋在王浆中,呈现蓝色的就是掺入淀粉的蜂王浆。
假蜂王浆
取一滴蜂王浆滴在滤纸上,再滴上一滴茚三酮试液,在105℃烘箱中烤3min,或在火苗上部 晃动至烘干,真蜂王浆会使滤纸上的斑点显蓝紫色,而假蜂王浆没有这个专一现象。化学检验方法要检出蜂王浆中独有成分——王浆酸,其他天然物质中均不存在这一成分。