Question

转基因动物转入目的基因后是不只能进行胚胎移植

Answer 1

（1）在构建基因表达载体时，常用的DNA连接酶有E?coliDNA连接酶（大肠杆菌DNA连接酶）、T4-DNA连接酶，二者均可以连接粘性末端，其中T4-DNA连接酶还可以连接平末端；如果目的基因要在乳腺细胞中表达，需将目的基因与乳腺蛋白基因的启动子结合，基因表达载体上还需标记基因和终止子等组件，载体一般要有一至多个限制酶切割位点便于插入目的基因．
（2）为了获得足够数量的受精卵，常用促性腺激素处理供体雌鼠，使其超数排卵，从输卵管中冲取卵子（卵母细胞），再完成体外受精即可．
（3）确定目的基因是否整合到染色体上，一般需用放射性同位素标记（荧光分子标记）的目的基因（单链），与转基因小鼠细胞中提取的基因组DNA（核DNA），进行DNA分子杂交，通过是否产生杂交链来检测．
（4）早期胚胎培养的培养液成分，除无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，并需添加动物血清等天然成分．
（5）在胚胎移植前，为了使胚胎移植前后处于相同的生理状态，要对接受胚胎的受体进行同期发情处理；移植后，要对受体雌鼠进行是否妊娠检查．
（6）胚胎干细胞具有体积小，细胞核大，核仁明显等特点，添加抑制分化的因子可以只分裂不分化．
故答案为：
（1）E?coliDNA连接酶（大肠杆菌DNA连接酶） T4-DNA连接酶 乳腺蛋白基因的启动子 目的基因的插入
（2）促性腺激素 输卵管 卵子（卵母细胞）
（3）放射性同位素标记（荧光分子标记）的目的基因（单链） 基因组DNA（核DNA）
（4）维生素 激素
（5）同期发情 妊娠
（6）体积小，细胞核大，核仁明显 抑制因子