DNA电泳条带下方有一团很亮是怎么回事?
我是用CTAB法,是DNA没提出来还是杂质太多影响了?要怎么解决?我是直接用刚提出来的DNA进行电泳检测,没有进行pcr的。...
我是用CTAB法,是DNA没提出来还是杂质太多影响了?要怎么解决?
我是直接用刚提出来的DNA进行电泳检测,没有进行pcr的。 展开
我是直接用刚提出来的DNA进行电泳检测,没有进行pcr的。 展开
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这个图片显示的结果有以下几种可能
DNA降解了,这种可能性最大,特别是中间三条“瀑布状态”的很可能是降解。
DNA污染,这种可能性存在,但是不太大。因为做DNA的实验一般都是比较小心的。
RNA没有去处干净,RNA分子小,跑的比较快,所以在最前边。
凝胶配置不合理,DNA没跑开。
楼主最好复盘一下实验过程,DNA提取以后多长时间跑的电泳,期间注意低温,是否被污染,加没加RNA酶。如果整个实验没问题,就需要再查文献调整凝胶配置。
追问
谢谢您的回答。回忆了我的过程确实有两个问题,一是我确实没有用RNA酶处理。二是我们的水浴锅有点问题控温不好,可能导致温度超过65,这会不会也是导致DNA降解的原因?
研载生物科技(上海)有限公司_
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一般来说是引物之间形成的二聚体,也可能是引物的随机扩增,最大的可能是没有目的片段。重新提一次DNA,最好设置阳性对照和阴性对照,就能说明问题了。
追问
我直接用我提出的DNA进行检测,没有放引物进行pcr哦。
追答
那可能是你提出来的DNA质量不好,发生降解所造成的
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这个有正常,就是一些非特异的条带,可以对大小正确的进行切胶,然后gel extraction即可
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第一第二个就没有条带。后面的可能是胶的浓度太低。当然也有可能是降解。建议提高胶的浓度或是用TBE配胶,再次电泳。
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PCR有问题喽,浓度不够,酶失活什么的,maker没问题那电泳至少是对的。
追问
这个是没有PCR的,刚刚提的DNA拿去跑胶就成这样了T.T
追答
刚刚提的。。。没加内切酶?那可不就是一坨了么
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