Question

从澡堂获得一种土壤，知道里面含有嗜热菌，但不知道是什么，怎么把它培养筛选出来进行鉴定！！求详细步骤！

从样品处理，到鉴定的全程步骤，本人是微生物文盲！谢谢！

Answer 1

1、稀释平板法分离培养：取1克土壤放入灭菌的试管中，加入9毫升无菌水，充分混匀；取出1毫升稀释液，加入另一只乘有9毫升无菌水的试管中，充分混匀；再取出1毫升稀释液，加入另一只乘有9毫升无菌水的试管中，充分混匀；依次类推，分别稀释1百倍、1千倍、1万倍。从不同稀释倍数的稀释液中分别取0.1毫升，涂布与细菌培养基平板上（如LB固体培养基），放在65℃的培养箱中培养1-5天，直到有明显的单菌落长出为止。
2、菌种纯化：等有明显的单菌落生长出来后，将不同形态的单菌落，划线分离纯化，在相同的培养条件下，获得纯化的耐热菌。将这些耐热菌转接在新鲜培养基上，在30℃培养，不能生长或生长非常缓慢的可以视为嗜热菌。
3、菌种鉴定：提取细菌（一般分离出的嗜热菌都是细菌）的基因组DNA，PCR扩增其16S rDNA，送公司测序，测序结果与GenBank数据库中已知序列比对，即可获得种属信息。如果再详细鉴定，还要做生理生化试验，并与模式菌株进行比较。

Answer 2

可以配置蛋白培养基，放于高温下处理，用接种器蘸取，涂在培养皿上，高温下保存至有菌落形成，选取较大较完整菌落，再次接种至新培养基中筛选。既然是耐热菌，保持高温培养即可达到筛选的目的