Question

作为基因工程的运载体应该具备什么条件

Answer 1

在基因操作过程中使用运载体有两个目的：一是用它作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞中去；二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制(称为克隆)。现在所用的运载体主要有两类：一类是细菌细胞质的质粒，它是一种相对分子质量较小、独立于染色体DNA之外的环状DNA(一般有1～200 kb左右，kb为千碱基对)，有的一个细菌中有一个，有的一个细菌中有多个。质粒能通过细菌间的接合由一个细菌向另一个细菌转移，可以独立复制，也可整合到细菌染色体DNA中，随着染色体DNA的复制而复制。另一类运载体是噬菌体或某些病毒等。现在人们还在不断寻找新的运载体，如叶绿体或线粒体DNA等也有可能成为运载体。 　　作为运载体必须具有四个条件：①在宿主细胞中能保存下来并能大量复制；②有多个限制酶切点，而且每种酶的切点最好只有一个，如大肠杆菌pBR322就有多种限制酶的单一识别位点，可适于多种限制酶切割的DNA插入；③有一定的标记基因，便于进行筛选。如大肠杆菌的pBR322质粒携带氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，就可以作为筛选的标记基因。④对受体细胞无害。一般来说，天然运载体往往不能满足上述要求，因此需要根据不同的目的和需要，对运载体进行人工改建。现在所使用的质粒载体几乎都是经过改建的。

Answer 2

1.有多个限制酶切点，便于携带目的基因
2.在宿主细胞中能保存下来并能大量复制，便于目的基因的扩增
3.有一定的标记基因，便于筛选
4.对受体细胞无毒害作用

Answer 3

1.具有复制起始点
2.具有一个或以上的抗菌素抗性基因
3.具有若干限制酶单一识别微点
4.有较小的分子量和较高的拷贝数

Answer 4

1)具有一个或多个限制酶切点，以供外源基因插入其中;
2)具有标记基因，以鉴定重组是否进入受体细胞;
3)能自我复制，否则可能导致重组丢失;
4)对受体细胞无害;
5)大小应适合，以便提取和在体外进行操作，太大不便操作。
(按照照讲义手打的，应该齐了)

Answer 5

1.能够复制并能在受体细胞中稳定保存和发挥作用。
2.有标记基因（另外还有启动子、终止子、复制原点等）
3.无害。