Question

pcr荧光探针法是什么?

Answer 1

pcr荧光探针法是是SYBRGreen掺入到双链DNA中的量。SYBRGreen掺入到双链DNA中后会发出荧光。但是只要是双链，它都掺。而探针法是当探针结合到目标序列上以后，聚合酶降解探针后，探针上自带的荧光基团离开淬灭基团，从而发出荧光。

荧光pcr检测

PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收，刚开始时，探针结合在DNA任意一条单链上，PCR扩增时，Taq酶的5端，3端外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离。