2015考研复习:微生物学笔记(八)?
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第八章微生物的遗传变异和育种遗传性:亲代具有把他所有的形状给子代的特性。变异性:子代具有改变亲代遗传性状的特征。遗传型(genotype),表型(phenotype),变异(varition),饰变(modification)。
第一节
遗传变异的物质基础三个典型实验: 转化试验:1928 年,F. Griffith,肺炎双球菌, Streptococcus pneumoniae。1944 年,O.T.Avery DNA RNA 蛋白质多糖DNA+DNA 酶RⅡ RⅡ RⅡ RⅡ RⅡ 少量SⅢ - - - ___ 噬菌体感染试验:1952 年,A. D. Hershey(侯喜) M. Chase(蔡斯) 病毒的重建试验: 1956 年,H. Fraenkel-Conrat (弗朗克-康勒脱) 噬菌体感染试验和病毒的重建试验的说明图见下页
朊病毒的发现和思考:蛋白质是否是遗传的物质基础?prpsc,蛋白质折叠。DNA 的结构基本单位是核苷酸:核糖(戊糖)+碱基+磷酸。碱基有四种:腺嘌呤(A),鸟嘌呤(G),胸腺嘧啶(T), 胞嘧啶(C)。单链上的碱基不受配对的限制,决定了遗传的多样性。半保留的自我复制保证了生物遗传的相对稳定。
第二节
基因突变和诱变育种20 基因突变(gene mutation):突变细胞的遗传物质的分子结构或数量发生可遗传的变化。突变的类型: 营养缺陷型(auxotroph)菌株:野生型菌株发生基因突变而丧失合成一种或几种生长因子的能力,从而不能在基本培养基上生长的变异菌株。抗性突变型 (resistant mutant)菌株:野生型菌株发生基因突变而对某化学药物或致死物理因子产生抗性的菌株。
条件致死突变型(conditional lethal mutant)菌株:菌株发生基因突变后,在某种条件下可正常生长,而在另一种条件下无法生长。形态突变型(morphological mutant)菌株:菌株发生基因突变,而在个体形态或菌落形态上发生突变的菌株。抗原突变型(antigenic mutant)菌株:菌株发生基因突变,而在细胞抗原结构上发生变异的菌株。产量突变型(metabolite quantitative mutant)菌株:菌株发生基因突变,在代谢产物产量上明显有别于原始菌株的突变株。正变株(plus-mutant);负变株(minus- mutant)。突变率(mutation rate):一个细胞每一世代某一性状突变的几率;群体中每一世代(分裂一次)产生突变的个数。突变率:10-8 基因突变的特点: 不对应性:突变的性状与引起突变的原因之间没有直接的对应关系; 自发性(10-6~10-9);稀有性;独立性;可诱变性;稳定性; 可逆性:回复突变(reverse(back)mutation)。证明基因突变自发性和不对应性的实验: 变量试验(fluctuation test):波动试验、彷徨试验;1943 年;S. E. Luria& M. Delbruck。涂布试验:1949 年,H.B.Newcombe 影印平板培养法(replica plating):1952 年,J. Lederberg 微生物产生抗药性的途径: 基因突变而产生抗药性; 抗药性质粒的获得(R 因子); 生理上的适应。基因突变及其机制: 右图为突变的类型。
诱变(induced mutation): 碱基的置换(substitution),转换(transition),颠换(transversion)。两个例子:亚硝酸;5-溴尿嘧啶(碱基类似 物base analog)。移码突变(frame-shift mutation phase-shift mutation)
染色体畸变(chromosomal aberration) 转座(transposition):DNA 序列通过非同源重组的方式,从染色体某一部位转移到同一染色体的另一部位或其它染色体上的某一部位。转座因子(transposable element):具有转座作用插入序列(insertion sequence,IS);转座子(transposon,Tn); 转座噬菌体(transposable phage) 自发突变(spontaneous mutation):由微生物自身有害代谢产物引起;由DNA 复制过程中碱基配对错误引起;由背景辐射和环境因素引起。遗传密码改变的表型效应:
紫外线对DNA 的损伤及其修复紫外线(ultraviolet ray)对DNA 的损伤;嘧啶二聚体; 光复活作用(photo reactivation,photo restoration) 切除修复(excision repair) 突变与育种自发突变与育种( Breeding by spontaneous mutation) 从生产中育种;定向培育优良菌株。自然选育的目的:维持原有的产物的合成水平(稳产);诱变后的菌株群体中表现出各种生理特性需要纯化。诱变育种 (breeding by induced mutation) 诱变育种的几个方向:提高产量;改进产品质量;产生新的生物活性物质诱变育种的基本环节(左图所示) 出发菌株→诱变→初筛→复筛→放大→获得优良变异株。诱变育种两个主要的环节:诱变(induced mutation);筛选(screening)。诱变育种中的几个原则: 诱变剂的选择:简便有效; 诱变剂的种类:物理诱变剂,化学诱变剂,拟辐射物质(radiomemetic chemical); 诱变剂量的选择:存活率或死亡率曲线,剂量-诱变率曲线; 出发菌株(original strain)的选择:处理细胞所处的状态,一般为单孢子悬液; 表型延迟(phenotype lag):遗传型虽已突变,但表型却要经染色体复制、分离和细胞的分裂后才表现出来。利用复合处理的协同效应(synergism);利用和创造形态、生 理和产量之间的相关指标;设计高效的筛选方法:推理选育。突变株的筛选:产量突变株的筛选,抗药性突变株的筛选,营养缺陷型菌株的筛选
营养缺陷型突变株:野生型菌株(wide type strain);原养型(prototroph); 回复突变株(back mutant, reverse mutant);基本培养基(minimum medium,MM); 补充培养基(supplemented medium,SM);完全培养基(complete medium,CM)。前体1→A→B→C→D→前体2 途径α β γ 酶↑ ↑ ↑ a b c 基因一个基因一条多肽链筛选营养缺陷型菌株的四个环节: 诱变;淘汰野生型(抗生素法,菌丝过滤法);检出缺陷型(夹层培养法,限量补充法,逐个检出法,影印平板法);鉴定缺陷型(生长谱法)。维生素的生长谱营 养缺陷型菌株的应用:赖氨酸,研究代谢途径。氨基酸的生长谱
研究代谢途径: 粗糙链孢霉(Neurospora crassa) 瓜氨酸- + + 鸟氨酸- - + 突变株Ⅰ 突变株Ⅱ 突变株Ⅲ 精氨酸+ + + 前体→鸟氨酸→瓜氨酸→精氨酸→.. 艾姆氏试验(Ames test):生物的遗传物质是核酸;凡对微生物有效的诱变剂对高等动物同样有效;化学药剂对细菌的诱变率与其对动物的致癌率成正比;凡致癌物质都是诱变 剂,但并非所有的诱变剂都能致癌;95%的致癌剂有诱变作用, 约90%的非致癌剂就没有诱变剂的作用。材料:鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型菌株,老鼠肝脏抽提液。
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第一节
遗传变异的物质基础三个典型实验: 转化试验:1928 年,F. Griffith,肺炎双球菌, Streptococcus pneumoniae。1944 年,O.T.Avery DNA RNA 蛋白质多糖DNA+DNA 酶RⅡ RⅡ RⅡ RⅡ RⅡ 少量SⅢ - - - ___ 噬菌体感染试验:1952 年,A. D. Hershey(侯喜) M. Chase(蔡斯) 病毒的重建试验: 1956 年,H. Fraenkel-Conrat (弗朗克-康勒脱) 噬菌体感染试验和病毒的重建试验的说明图见下页
朊病毒的发现和思考:蛋白质是否是遗传的物质基础?prpsc,蛋白质折叠。DNA 的结构基本单位是核苷酸:核糖(戊糖)+碱基+磷酸。碱基有四种:腺嘌呤(A),鸟嘌呤(G),胸腺嘧啶(T), 胞嘧啶(C)。单链上的碱基不受配对的限制,决定了遗传的多样性。半保留的自我复制保证了生物遗传的相对稳定。
第二节
基因突变和诱变育种20 基因突变(gene mutation):突变细胞的遗传物质的分子结构或数量发生可遗传的变化。突变的类型: 营养缺陷型(auxotroph)菌株:野生型菌株发生基因突变而丧失合成一种或几种生长因子的能力,从而不能在基本培养基上生长的变异菌株。抗性突变型 (resistant mutant)菌株:野生型菌株发生基因突变而对某化学药物或致死物理因子产生抗性的菌株。
条件致死突变型(conditional lethal mutant)菌株:菌株发生基因突变后,在某种条件下可正常生长,而在另一种条件下无法生长。形态突变型(morphological mutant)菌株:菌株发生基因突变,而在个体形态或菌落形态上发生突变的菌株。抗原突变型(antigenic mutant)菌株:菌株发生基因突变,而在细胞抗原结构上发生变异的菌株。产量突变型(metabolite quantitative mutant)菌株:菌株发生基因突变,在代谢产物产量上明显有别于原始菌株的突变株。正变株(plus-mutant);负变株(minus- mutant)。突变率(mutation rate):一个细胞每一世代某一性状突变的几率;群体中每一世代(分裂一次)产生突变的个数。突变率:10-8 基因突变的特点: 不对应性:突变的性状与引起突变的原因之间没有直接的对应关系; 自发性(10-6~10-9);稀有性;独立性;可诱变性;稳定性; 可逆性:回复突变(reverse(back)mutation)。证明基因突变自发性和不对应性的实验: 变量试验(fluctuation test):波动试验、彷徨试验;1943 年;S. E. Luria& M. Delbruck。涂布试验:1949 年,H.B.Newcombe 影印平板培养法(replica plating):1952 年,J. Lederberg 微生物产生抗药性的途径: 基因突变而产生抗药性; 抗药性质粒的获得(R 因子); 生理上的适应。基因突变及其机制: 右图为突变的类型。
诱变(induced mutation): 碱基的置换(substitution),转换(transition),颠换(transversion)。两个例子:亚硝酸;5-溴尿嘧啶(碱基类似 物base analog)。移码突变(frame-shift mutation phase-shift mutation)
染色体畸变(chromosomal aberration) 转座(transposition):DNA 序列通过非同源重组的方式,从染色体某一部位转移到同一染色体的另一部位或其它染色体上的某一部位。转座因子(transposable element):具有转座作用插入序列(insertion sequence,IS);转座子(transposon,Tn); 转座噬菌体(transposable phage) 自发突变(spontaneous mutation):由微生物自身有害代谢产物引起;由DNA 复制过程中碱基配对错误引起;由背景辐射和环境因素引起。遗传密码改变的表型效应:
紫外线对DNA 的损伤及其修复紫外线(ultraviolet ray)对DNA 的损伤;嘧啶二聚体; 光复活作用(photo reactivation,photo restoration) 切除修复(excision repair) 突变与育种自发突变与育种( Breeding by spontaneous mutation) 从生产中育种;定向培育优良菌株。自然选育的目的:维持原有的产物的合成水平(稳产);诱变后的菌株群体中表现出各种生理特性需要纯化。诱变育种 (breeding by induced mutation) 诱变育种的几个方向:提高产量;改进产品质量;产生新的生物活性物质诱变育种的基本环节(左图所示) 出发菌株→诱变→初筛→复筛→放大→获得优良变异株。诱变育种两个主要的环节:诱变(induced mutation);筛选(screening)。诱变育种中的几个原则: 诱变剂的选择:简便有效; 诱变剂的种类:物理诱变剂,化学诱变剂,拟辐射物质(radiomemetic chemical); 诱变剂量的选择:存活率或死亡率曲线,剂量-诱变率曲线; 出发菌株(original strain)的选择:处理细胞所处的状态,一般为单孢子悬液; 表型延迟(phenotype lag):遗传型虽已突变,但表型却要经染色体复制、分离和细胞的分裂后才表现出来。利用复合处理的协同效应(synergism);利用和创造形态、生 理和产量之间的相关指标;设计高效的筛选方法:推理选育。突变株的筛选:产量突变株的筛选,抗药性突变株的筛选,营养缺陷型菌株的筛选
营养缺陷型突变株:野生型菌株(wide type strain);原养型(prototroph); 回复突变株(back mutant, reverse mutant);基本培养基(minimum medium,MM); 补充培养基(supplemented medium,SM);完全培养基(complete medium,CM)。前体1→A→B→C→D→前体2 途径α β γ 酶↑ ↑ ↑ a b c 基因一个基因一条多肽链筛选营养缺陷型菌株的四个环节: 诱变;淘汰野生型(抗生素法,菌丝过滤法);检出缺陷型(夹层培养法,限量补充法,逐个检出法,影印平板法);鉴定缺陷型(生长谱法)。维生素的生长谱营 养缺陷型菌株的应用:赖氨酸,研究代谢途径。氨基酸的生长谱
研究代谢途径: 粗糙链孢霉(Neurospora crassa) 瓜氨酸- + + 鸟氨酸- - + 突变株Ⅰ 突变株Ⅱ 突变株Ⅲ 精氨酸+ + + 前体→鸟氨酸→瓜氨酸→精氨酸→.. 艾姆氏试验(Ames test):生物的遗传物质是核酸;凡对微生物有效的诱变剂对高等动物同样有效;化学药剂对细菌的诱变率与其对动物的致癌率成正比;凡致癌物质都是诱变 剂,但并非所有的诱变剂都能致癌;95%的致癌剂有诱变作用, 约90%的非致癌剂就没有诱变剂的作用。材料:鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型菌株,老鼠肝脏抽提液。
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