一个PCR反应能扩增出多少DNA
2017-01-30
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如果你做的是非常靠谱的绝对定量RT-PCR,可以根据标曲算。
但实际上对包括RT-PCR在内的PCR产物浓度定量,更简单、更靠谱的办法是:
1,加标准marker电泳,用照胶自动分析系统计算,可以大致定量,得其质量浓度;
2,更准的是,回收PCR产物,用紫外分光光度计准确测定其质量浓度。
“先算出模板链的质量然后用2的N-1次方算出扩增后DNA的数量相乘”,这是有误区的,实际的PCR反应不是理想的指数扩增过程,尤其是循环到了一定次数后。何况,还要考虑特异性的问题。
如有疑问,欢迎继续讨论,纯属手打,欢迎采纳,祝愉快!
但实际上对包括RT-PCR在内的PCR产物浓度定量,更简单、更靠谱的办法是:
1,加标准marker电泳,用照胶自动分析系统计算,可以大致定量,得其质量浓度;
2,更准的是,回收PCR产物,用紫外分光光度计准确测定其质量浓度。
“先算出模板链的质量然后用2的N-1次方算出扩增后DNA的数量相乘”,这是有误区的,实际的PCR反应不是理想的指数扩增过程,尤其是循环到了一定次数后。何况,还要考虑特异性的问题。
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