Question

rt-pcr中没有溶解曲线的原因是什么？(Ct值有的)

Answer 1

溶解曲线的意思是：当温度高于扩增产物的TM值时，双链产物变单链，荧光值因为这样的变化而产生变化，根据这一原理，你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化，比如你用的是TAQMAN探针，taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的，那么在只有温度变化的情况下，是没有荧光值变化的，自然就没有溶解曲线了。但是假如你用的分子信标探针或者sybgreen燃料，情况就不同了。

追问

谢谢^^我用的是SYBGreen，是不是我调一下y轴，只要出现的是单峰就可以了呢？还有什么需要注意的吗？

追答

没看到你的实验结果，所以我也不清楚，最简单的方法就是上网找找SYBGREEN的溶解曲线图片，比较一下就知道了。