Question

为什么PCR技术中 要两种不同的引物？

Answer 1

假设下面两行碱基为模板链进行复制，DNA是两条反向平行的双链结构，而复制时只能从固定的方向开始向后延伸，你看所需的引物是不同的
ATTCGGATTGGCCCAATTC
----------------------------------→
←----------------------------------
TAAGCCTAACCGGGTTAAG

想知道DNA复制时具体的方向，可以看选修1 第5章 第2课题，还是看不懂的话，可以追问。

Answer 2

引物长度，20bp；tm值可以设置在55度（实验的时候可以用60度退火，两条引物的退火温度不要相差大于2度）；产物长度，100-150bp（如果没有合适的引物，产物长度可以设置在80-200）。
如需设计引物，可以微信搜索“为青生物”，由专业人员提供免费的荧光定量pcr引物设计服务。

Answer 3

引物只能沿特定方向延伸，两条链的延伸方向是不同的。