Question

[选做―现代生物科技专题]（14分）：下图是将人的生长素基因导入细菌B细胞内培育“工程菌”示意图，所用运

1）获取目的基因的方法，一是________________________________________________；二是

________________________________________________。（2）如何使目的基因和质粒结合形成重组质粒？________________________________________________。（3）目前把重组质粒导入细菌时，效率还不高，有的只导入普通质粒A，只有极少数导入的是重组质粒，而大部分根本没有导入质粒。此处可通过如下步骤鉴别得到的细菌是否导入了质粒A或重组质粒：将得到的细菌涂抹在一个含氨苄青霉素培养基上，能够生长的就导入了，反之则没有。使用这种方法鉴别的原因是____________________________________。（4）若把已导入了普通质粒A或重组质粒的细菌放在含四环素的培养基上培养，将会发生_______________现象，原因是________________________________________________。

Answer 1

如下：
1）获取目的基因的方法，一是（从基因文库获取）；二是（PCR扩增）。
2）如何使目的基因和质粒结合形成重组质粒？
（用同种限制酶对目的基因和质粒进行酶切，然后用DNA连接酶进行连接）。
3）目前把重组质粒导入细菌时，效率还不高，有的只导入普通质粒A，只有极少数导入的是重组质粒，而大部分根本没有导入质粒。此处可通过如下步骤鉴别得到的细菌是否导入了质粒A或重组质粒：将得到的细菌涂抹在一个含氨苄青霉素培养基上，能够生长的就导入了，反之则没有。使用这种方法鉴别的原因是（重组DNA质粒中的氨苄青霉素抗性基因表达，可以抵抗青霉素）。
（4）若把已导入了普通质粒A或重组质粒的细菌放在含四环素的培养基上培养，将会发生（含有普通质粒的细菌正常存活，含有重组质粒的细菌死亡）现象，原因是（普通质粒含有四环素抗性基因，可以表达；重组质粒四环素抗性基因遭到破坏，被切断，无法表达）。

Answer 2

图呢？题呢？