Question

怎样做组织培养的培养基

我想做一下生物书中组织培养的实验 请告诉我培养基用什么做 不要只说成分 最好举几个例子请在告诉我一下注意事项

Answer 1

通常做植物组培用到的基本培养基为MS培养基，成分我就不一一讲了，近二十种，分为大量元素、微量元素、铁盐、有机成分。只做一次的话就把药品按量添加在一起，经常做的话可以把各大类元素按20倍或200倍的量配制成母液，然后用移液枪定量吸取加入，之后再根据需要添加蔗糖、水和琼脂等，加热均匀搅拌（最好煮沸），然后根据植物的需求调整培养基pH，再定量装入瓶中，高温灭菌。激素的添加需要看其能否高温灭菌，耐高温的激素可以在制作培养基时随药品一起加入，不耐高温的激素则要求在培养基做好后常温过滤加入。制好后的培养基放置两三天看是否被真菌或细菌污染（污染的废弃），然后可进行外植体接种。最后提醒一点是称量药品一定要准确，操作一定要严格，组织培养要求的过程比较苛刻。

Answer 2

用肉汤，琼脂混合制作

Answer 3

网上搜一下培养基配方，注意消毒灭菌。紫外灯，通风厨，酒精，汞！不在实验室自己做应该不行吧！

Answer 4

（1）器具的消毒。组培前玻璃器皿等要用洗衣粉刷洗干净备用。接种室和超净工作台用70%酒精擦洗，并用紫外光照射。其他用具也要进行高温消毒。

（2）培养材料的采集。组培所用的植物材料可采用根、茎、叶、花、芽及种子的子叶、胚轴的一部分，有时也可利用花粉或花药。通常应取初生幼嫩的材料，这些材料在移入培养基时都必须保持鲜嫩状态，否则组培将会失败。

（3）培养材料的消毒。先将采集来的材料用自来水冲洗干净，再用蒸馏水冲洗2～3遍，然后用无菌纱布将材料上的水分吸干，切成小块，放入70%酒精中浸泡15～30秒，再用30%漂白粉澄清液浸泡20分钟消毒，最后用无菌水冲洗3～5遍。

（4）制备外植体。将上述经过灭菌的材料，用在火焰上消过毒的刀、剪、镊，在消毒滤纸上剥去芽的鳞片，嫩枝的外皮和种皮胚乳等，然后切成长0.2～0.5厘米的小片（这些小片就是外植体）。在操作过程中，严禁用手触动这些材料。

（5）接种培养。在无菌条件下将切好的外植体立即接种在培养基上。接种后所用试管和三角瓶都要用无菌药棉封口，放培养室培养架上培养。每天用日光灯照12～16小时。保持在25℃±20℃。也可采用变温培养，夜间温度略低于白天。

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