本人做分子生物,请教高手遇到低GC片段怎么扩,我PCR做了好多次都没有目的片段,求高手指点。

boonma
2012-07-12 · TA获得超过4124个赞
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降低退火温度,如果GC很低的话,就把退火温度调到53-55度,扩五个循环后在提高退火温度到58度左右继续扩增;PCR仪都可以这样设置的。
luckydrink
2012-07-14 · TA获得超过3093个赞
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高GC片段,可能需要特异的buffer,低GC还好啦,可以将引物稍微长一点,退火温度低一点就好啦
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