Question

DNA合成是什么？

它是在上述促进剂存在的情况下应用DNA聚合酶进行的DNA合成反应;DNA合成反应促进剂,...因此可以比传统的DNA合成反应更有效地合成DNA.

Answer 1

DNA合成包括生物学合成和化学合成2种：
（1）生物学合成需要以亲代双链DNA为模板，以四种dNTP(dATP、dGTP、dCTP、dTTP)为原料，还需要各种酶的催化及其他蛋白质共同参与，合成方向为5'→3'方向延伸。
（2）化学合成即固相合成，利用固相亚磷酰胺合成技术将RNA固定在CPG固相载体上的过程，合成由3'方向开始延伸。此过程共（1）脱保护。酸催化去除DMT（二甲氧基三苯基甲基）基团，以便下一轮碱基（dA、dC、dG和dT）添加。（2）碱基偶联。将含有DMT保护基团护的亚磷酰胺通过四唑活化剂加到未保护的5’ OH末端。（3）加帽。将游离的5’ OH乙酰化，以防止进一步的链延伸所造成的单碱基缺失。（4）氧化。通过碘液将磷酸三酯氧化为磷酸盐，进入一个反应循环。

Answer 2

按照预定核苷酸的顺序，将脱氧核苷酸逐个进行人工连接合成DNA链的方法。目前多是采用固相合成法，即是在多聚体支持物上从3′端延伸核苷酸，可自动化操作。