Question

磷酸盐缓冲液的缓冲范围是多少啊？

我准备做梯度PH洗脱纯化蛋白，所以要研究下缓冲液。

Answer 1

磷酸缓冲液的缓冲pH值范围非常广泛，可配置各种pH值的酸性、碱性和中性缓冲液，配制酸性缓冲液可直接用NaH2PO4或KH2PO4，pH范围在1-5。

碱性缓冲液可直接用Na2HPO4或K2HPO4，pH范围在9-12；中性缓冲液则用等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，pH在5.5-8.5。取储存液1.25mL，用蒸馏水稀释至1000mL。分装每瓶100mL或每管10mL，121℃高压灭菌15min。

配制方法

0.2M磷酸缓冲液

磷酸缓冲液PH5.7--8.0(0.2M)

甲液：

NaH2PO4·2H2O：Mr=156.03，0.2mol/L溶液为31.21g/L。

NaH2PO4·H2O：Mr=138.01，0.2mol/L溶液为27.6g/L。

乙液：

Na2HPO4·2H2O：Mr=178.05，0.2mol/L溶液为35.61g/L。

Na2HPO4·7H2O：Mr=268.13，0.2mol/L溶液为53.624 g/L 。

Na2HPO4·12H2O：Mr=358.22，0.2mol/L溶液为71.64g/L。

Answer 2

磷酸盐缓冲液
磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2M）
pH 0.2M Na2HPO4/ml 0.2M NaH2PO4/ml
5.8 8.0 92.0
5.9 10.0 90.0
6.0 12.3 87.7
6.1 15.0 85.0
6.2 18.5 81.5
6.3 22.5 77.5
6.4 26.5 73.5
6.5 31.5 68.5
6.6 37.5 62.5
6.7 43.5 56.5
6.8 49.5 50. 5
6.9 55.0 45.0
7.0 61.0 39.0
7.1 67.0 33.0
7.2 72.0 28.0
7.3 77.0 23.0
7.4 81.0 19.0
7.5 84.0 16.0
7.6 87.0 13.0
7.7 89.5 10.5
7.8 91.5 8.5
7.9 93.0 7.0
8.0 94.7 5.3

Na2HPO4•2H2O分子量＝178.05 0.2M溶液含35.61g/L
Na2HPO4•12 H2O分子量＝358.22 0.2M溶液含71.64g/L
NaH2PO4•H2O分子量＝138.01 0.2M溶液含27.6g/L
NaH2PO4•2H2O分子量＝156.03 0.2M溶液含31.21g/L

Answer 3

常用范围：
磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液: 5.8-8.0;
磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液: 4.92-8.18;
磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液:5.8-8.0

Answer 4

范围是5—8，可以查下配方的