提取质粒时有用到溶液1、溶液2、溶液3,分别是什么啊
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溶液Ⅰ:50mMl 葡萄糖/10mMl EDTA/25mMl Tris-HCl,pH=8.0
溶液Ⅱ:0.2Ml NaOH/1% SDS
溶液Ⅲ:3Ml 醋酸钾/2Ml 醋酸
溶液1称为悬浮液,是用来把细菌悬浮均匀的,为下一步的裂解做准备;溶液2称为裂解液,是裂解细菌菌体,使其释放质粒的,该步骤不能超过5分钟;溶液3称为中和液,用来中和溶液二继续裂解,避免基因组DNA的污染。
扩展资料:
溶液Ⅱ
此步为碱处理。其中NaOH主要是为了溶解细胞,释放DNA,因为在强碱性的情况下,细胞膜发生了从双层膜结构向微囊结构的变化。SDS与NaOH联用,其目的是为了增强NaOH的强碱性,同时SDS作为阴离子表面活性剂破坏脂双层膜。这一步要记住两点:第一,时间不能过长,因为在这样的碱性条件下基因组DNA片断也会慢慢断裂;第二,必须温柔混合,不然基因组DNA会断裂。
参考资料来源:百度百科-质粒抽提
利穗科技
2024-04-23 广告
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质粒裂解系统是一种高效的生物技术工具,用于从细菌中提取质粒DNA。该系统基于特定的裂解缓冲液和蛋白酶,能够快速、选择性地破坏细菌细胞壁和细胞膜,释放质粒DNA。与传统的煮沸法或碱裂解法相比,质粒裂解系统具有更高的提取效率和纯度,操作简便,节...
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楼上说的不错,溶液1称为悬浮液,是用来把细菌悬浮均匀的,为下一步的裂解做准备;溶液2称为裂解液,是裂解细菌菌体,使其释放质粒的,该步骤不能超过5分钟;溶液3称为中和液,用来中和溶液二继续裂解,避免基因组DNA的污染。
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溶液Ⅰ 50mMl 葡萄糖 / 10mMl EDTA / 25mMl Tris-HCl,pH=8.0
溶液Ⅱ 0.2Ml NaOH / 1% SDS
溶液Ⅲ 3Ml 醋酸钾 / 2Ml 醋酸
溶液Ⅱ 0.2Ml NaOH / 1% SDS
溶液Ⅲ 3Ml 醋酸钾 / 2Ml 醋酸
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楼上说的很好,补充一点,一般抽质粒的时候溶液I里面可以加1%的RNase
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