Question

求MS培养基的配制步骤,需要详细点的介绍,

Answer 1

激素母液的配制
各种生长素和细胞分裂素要单独配制,不能混合在一起,生长素类一般要先用少量95%的酒精或1当量的NaOH溶解,细胞分裂素一般要先用1当量的盐酸溶解,然后再加蒸馏水定容.一般取100mg配成100ml母液.
2、配制培养基
以配置1L MS培养基为例,按顺序进行如下操作：
1、先在烧杯中放入一些蒸馏水.
2、分别取MS中的母液10ml倒入.
3、一般称取30g蔗糖倒入,搅拌溶解.
4、加蒸馏水用量筒定溶至1L.
5、按设计好的方案添加各种激素,由于激素的用量很小,而且激素对组培植物的生长至关重要.所以有条件的话最好用微量可调移液器吸取,减少误差.
6、用精密试纸或酸度计调整PH至5.7-5.8.（有条件的话使用酸度计,比较精确） 可配1当量的HCL和1当量的NaOH用来调溶液PH值.
1当量HCL配制：用量筒量取8.3ml配成100ml溶液.
1当量NaOH配制：称取NaOH 4g 配成100ml溶液.
7、称取5g左右琼脂粉（质量好的琼脂粉),倒入上面配好的溶液中,放在电炉上加热至沸腾,直到琼脂粉熔化.
8、稍微冷却后,分装入培养容器中.无盖的培养容器要用封口膜或牛皮纸封口,用橡皮筋或绳子扎紧.
9、放入消毒灭菌锅灭菌,灭菌20分钟左右.
10、灭菌后从灭菌锅中取出培养基,平放在实验台上令其冷却凝固.
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