Question

利用PCR技扩增目的基因，从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为

请给出详细的解释，比如图解

Answer 1

分两种情况，如果引物A能够与互补链完全结合，那说明引物A的序列与DNA一条单链中的某一段序列相同，这样第四轮PCR产物中含有引物A的DNA片段所占比例为100%。

另一种情况，引物A含有酶切位点或更换的碱基，不能与原始DNA完全互补，这时可以用公式（2^n-1)/2^n计算，n为循环数，第四循环产物中含有引物A的DNA片段所占比例是(2^4-1)/2^4=15/16。
解释：假设有一段DNA，可以用引物A和引物B扩增目的片段，那么
第一轮循环产物：两段DNA，分别含有引物A和引物B，原来的DNA解链后，引物A、B分别与互补链退火延伸。
第二轮循环产物：4段DNA，仅有1段没有引物A。第一轮循环产物中含有引物A的DNA，扩增为2后均含有引物A，产物中含有引物B的DNA，类似起始的DNA，扩增为2后，一段含有A，即与含有引物B的单链互补退火后延伸的产物，而引物B与另一单链退火延伸，所以没有引物A。以下类似。
第三轮循环产物：8段DNA，仅有1段没有引物A，此时真正出现要扩增的目的片段。
第四轮循环产物：16段DNA，仅有1段没有引物A，从此轮开始，目的片段以指数形式扩增。
..........
第n轮循环产物：2^n段DNA，仅有1段没有引物A。

图解没有画好，自己在纸上比划一下吧，其实不难，希望有所帮助。