Question

DNA片段的制备 完全酶切部分酶切的方法区别

Answer 1

完全酶切，是指使用的内切酶在目标片段上的切点全部切开，切出来的片段大小不会因为酶量增加，或酶切时间加长而导致片段大小发生改变（确保不发生星号活性的量和时间）。克隆构建载体时，就是使用的完全酶切。所有的切点都切了。
部分酶切是指，只对片段上一部分酶切位点产生切割。这种一般是在建库，或者需要酶切基因组后，获得一定大小范围内的片段而使用的酶切方法。这种酶切不要求获得某一大小的片段，而是要获得例如200-500bp的片段，在电泳上没有条带，而是smear。所以部分酶切需要严格控制酶的用量和时间，要尝试稀释后的酶液，切一定时间段内，哪一个条件可以获得目标范围的片段。
部分酶切的条件需要更多的摸索，而且重复性要求也会更高。