Question

加热会使蛋白质变性，在变性过程中肽键是否因此而断裂呢？请设计一个证明“蛋白质在加热变性后肽键没有断

加热会使蛋白质变性，在变性过程中肽键是否因此而断裂呢？请设计一个证明“蛋白质在加热变性后肽键没有断裂”的实验。 材料、用具：0.01 g·mL－1的CuSO4的溶液、0.1 g·mL－1的NaOH溶液、蛋清、清水、酒精灯、试管、滴管等必备用品。 实验原理： ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 方法步骤： ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 预期结果： ________________________________________________________________________。 实验结论： ________________________________________________________________________。
答案：原理：蛋白质能与双缩脲试剂发生紫色反应，是因为蛋白质中含有肽键。将加热变性的蛋白质与双缩脲试剂混合，如果也能发生紫色反应，则证明蛋白质在加热变性后肽键没有断裂 步骤：(1)取2支试管，编号1、2；(2)向两支试管中分别加入2 mL稀释的蛋清液，并将1号试管中的蛋清液加热煮沸3～5 min；(3)分别加入1 mL 0.1 g/mL的NaOH溶液，振荡试管；(4)然后分别向两支试管中缓慢滴入4滴0.01 g/mL的CuSO4溶液，振荡试管，观察实验现象 结果：1号、2号试管中均出现紫色反应 结论：蛋白质在加热变性后肽键没有断
为什么先加NaOH，后加CuSO4？
还有用量有什么讲究？

Answer 1

这里NaOH应该还有一个作用，就是溶解变性蛋白吧。不然变性蛋白以非可逆变性形式存在不会起反应吧？

Answer 2

反应需在碱性条件下，化学书上有这个反应，若先加入硫酸铜[CuSO4]溶液，再加入氢氧化钠[NaOH]溶液，则无法充分制造碱性环境，此时CuSO4会与NaOH发生复分解反应，生成蓝色氢氧化铜[Cu(OH)2]沉淀，导致现象不清，无法较好地达到实验目的
用两方面，一般是加入一滴NAOH，四滴CUSO4，后者不能太多，否者多于的CUSO4会与前者反应生成蓝色物质，干扰紫色的观察

Answer 3

请参考http://baike.baidu.com/view/532386.htm