Question

制备的质粒DNA样品琼脂糖凝胶电泳后会出现2至3条带,为什么？可采取什么措施减少该情况出现？？

Answer 1

质粒有三种状态：超螺旋、开环、线性。
开环是超螺旋结构中1条链的断裂，线性就是2条链都断了。
要想提高质粒的超螺旋比例，提取的时候各个尽量轻柔，一般在TE溶液中，DNA酶的作用基本上都被封闭了，质粒的断裂大部分来自与溶液的剪切力。所以各步骤操作的轻柔很重要。不过这种开环对质粒的转化转染影响不大。