Question

分光光度计法算某物质含量

取样品1ML于100ML容量瓶定容，从中取5ML于比色管中，水稀释至25ML，分别加1ML的缓冲溶液和1 ML的显色剂，分光光度计测得浓度为0.2Mg/l,(标准曲线已做)请问如何算样品中该物质的含量？我的算法是0.2*27*100/5=108Mg,可是实际上样品中该物质是我添加的，大约60Mg,请问哪里算错了？

Answer 1

基本原理 由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中，激发样品中的荧光物质发出荧光，荧光经过滤过和反射后，被光电倍增管所接受，然后以图或数字的形式显示出来。 物质荧光的产生是由在通常状况下处于基态的物质分子吸收激发光后变为激发态, 这些处于激发态的分子是不稳定的,在返回基态的过程中将一部分的能量又以光的形式放出，从而产生荧光． 不同物质由于分子结构的不同,其激发态能级的分布具有各自不同的特征，这种特征反映在荧光上表现为各种物质都有其特征荧光激发和发射光谱；，因此可以用荧光激发和发射光谱的不同来定性地进行物质的鉴定。

Answer 2

0.2*27*100/5=108Mg中的27是什么？原题没有交代不好判断。如果计算没错，问题就是测定过程（包括配制溶液过程、标准曲线的误差）和仪器（包括仪器的波动、比色皿的不均一）等多因素影响所致。解决办法：重新重复做几次看看，一定可以找到原因的。

追问

27是25ml+1ml的缓冲液+1ml的显色剂，再帮忙看看呗，谢谢

追答

标准曲线上的浓度0.2Mg/l是比色管中的实际浓度的话，你的计算无误。误差来之仪器、溶液配制等因素。

Answer 3

和标准曲线的测量方法完全一样吗？还是所用比色皿不一样，比色皿不一样，吸光度有差别

Answer 4

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