Question

各位高手帮个忙，解决几个问答题~~~有关生物化学的~~急！！！！

1、请简述蛋白质一、二、三、四级结构的内容，并说明其主要维系力。
2、请叙述蛋白质α—螺旋，β—折叠，β—转角结构的主要内容及参数。
3、蛋白质含量的测定方法有哪些，其主要原理是什么？
4、蛋白质相对分子质量测定的方法有哪些，其主要原理是什么？
5、什么是蛋白质的沉淀作用，引起蛋白质沉淀的因素有哪些？
6、什么是蛋白质的变性作用，引起蛋白质变性的因素有哪些？
7、蛋白质的变性作用与沉淀作用之间有什么关系，分别列举一到两个蛋白质沉淀变性、变性不沉淀及沉淀不变性的例子。
如果可能的话，请简短一些，不可能就不用简短了。

Answer 1

蛋白质整体的结构　　蛋白质是以氨基酸为基本单位构成的生物高分子。蛋白质分子上氨基酸的序列和由此形成的立体结构构成了蛋白质结构的多样性。蛋白质具有一级、二级、三级、四级结构，蛋白质分子的结构决定了它的功能。
一级结构：蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序，以及二硫键的位置。
二级结构：蛋白质分子局区域内，多肽链沿一定方向盘绕和折叠的方式。
三级结构：蛋白质的二级结构基础上借助各种次级键卷曲折叠成特定的球状分子结构的空间构象。
四级结构：多亚基蛋白质分子中各个具有三级结构的多肽链，以适当的方式聚合所形成的蛋白质的三维结构。
连接方法：用约20种氨基酸作原料，在细胞质中的核糖体上，将氨基酸分子互相连接成肽链。一个氨基酸分子的氨基，脱去一分子水而连接起来，这种结合方式叫做脱水缩合。通过缩合反应，在羧基和氨基之间形成的连接两个氨基酸分子的那个键叫做肽键。由肽键连接形成的化合物称为肽。
蛋白质的变性
在热、酸、碱、重金属盐、紫外线等作作用下，蛋白质会发生性质上的改变而凝结起来．这种凝结是不可逆的，不能再使它们恢复成原来的蛋白质．蛋白质的这种变化叫做变性．蛋白质变性之后，紫外吸收，化学活性以及粘度都会上升，变得容易水解，但溶解度会下降。[3]
蛋白质变性后，就失去了原有的可溶性，也就失去了它们生理上的作用．因此蛋白质的变性凝固是个不可逆过程．
蛋白质沉淀
原因：加入高浓度的中性盐、加入有机溶剂、加入重金属、加入生物碱或酸类、热变性
少量的盐（如硫酸铵、硫酸钠等）能促进蛋白质的溶解。如果向蛋白质水溶液中加入浓的无机盐溶液，可使蛋白质的溶解度降低，而从溶液中析出，这种作用叫做盐析．
这样盐析出的蛋白质仍旧可以溶解在水中，而不影响原来蛋白质的性质，因此盐析是个可逆过程．利用这个性质，采用分段盐析方法可以分离提纯蛋白质．
蛋白质检测　
　分别向甲乙两支试管加入3毫升蛋清稀释液和清水，再依次向两支试管中加入双缩脲试剂A液和B液。观察甲乙俩试管中溶液发生的颜色变化。上述的演示实验结果表明，双缩脲试剂与蛋白质呈现紫色反应

.蛋白质相对分子质量的计算　　设氨基酸的平均相对分子质量为a，蛋白质的相对分子质量=ma-18（m-n）
关于蛋白质相对分子质量测定
看这http://wenku.baidu.com/view/420329db5022aaea998f0fbf.html

Answer 2

手打~~没功劳也有苦劳~~

①
一级结构：蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序，以及二硫键的位置。(肽键)
二级结构：蛋白质分子局区域内，多肽链沿一定方向盘绕和折叠的方式。（H键）
三级结构：蛋白质的二级结构基础上借助各种次级键卷曲折叠成特定的球状分子结构的空间构象。（主要是弱相互作用力，包括H键，范德华力，疏水作用，盐键）
四级结构：多亚基蛋白质分子中各个具有三级结构的多肽链，以适当的方式聚合所形成的蛋白质的三维结构。（二硫键）
②
α螺旋：蛋白质中常见的二级结构，每隔3.6个残基，螺旋上升一圈；每一个氨基酸残基环绕螺旋轴100°，螺距为0.54nm，即每个氨基酸残基沿轴上升0.15nm；螺旋的半径是0.23nm；Φ角和Ψ角分别为-57°和-48°；
β折叠：是蛋白质的二级结构，肽键平面折叠成锯齿状，相邻肽链主链的N-H和C=O之间形成有规则的氢键，在β-折叠中，所有的肽键都参与链间氢键的形成，氢键与β-折叠的长轴呈垂直关。包括平行结构和反平行两种类型
β转角：又称发夹结构，含四个氨基酸残基，不稳定的环状结构，多位于球状蛋白分子表面
③
主要用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量（其他还有化学组成测定法，渗透压法，扩散法，沉降分析法，凝胶过滤法）

SDS是一种阴离子表面活性剂，在一定的条件下，它能打开蛋白质氢键和疏水键，并按比例地结合到这些蛋白质分子上形成带负电荷的蛋白质-SDS复合物，每克蛋白质一般结合1.4克SDS。

⑤
沉淀指破坏蛋白质胶体性质聚集而成沉淀
因素：中核电荷（盐析法）脱去水化层（有机溶剂沉淀，盐析）带负电蛋白质与重金属阳离子结合，带正电蛋白质与酸根负离子结合，加热变性沉淀
⑥
变性指在物理化学因素影响下，次级键破坏，天然构象解体（变性不涉及共价键破坏，一级结构完好）
因素（物理）：加热（70-100度），紫外线，超声波
（化学）：强酸碱，有机溶剂，脲，胍，SDS，重金属盐，苦味酸，三氯乙酸
⑦
沉淀可以是由蛋白质变性从而产生沉淀（通俗说就是药品加少了沉淀，加多了变性）
盐析法（nacl），乙醇粗提蛋白质 是沉淀不是变性

变性蛋白溶解度降低，易成沉淀（但在碱溶液，尿素，胍等变性因素存在时蛋白质依旧保持溶解状态）