Question

怎么做硅胶柱层析分离？

Answer 1

常说的过柱子应该叫柱层析分离，乎巧也叫柱色谱，具体原理和方法如下：

柱层析原理：柱层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而使各组分分离。一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附。

当采用溶剂洗脱时，发生一系列吸附→解吸岁喊键→再吸附→再解吸的过程，吸附力较强的组分，移动的距离小，后出柱；吸附力较弱的组分，移动的距离大，先出柱。

柱层析分离渗备的注意事项

装柱子时从下往上装，先塞棉花，这个主要是为了不漏石英砂和硅胶。然后倒入石英砂，到图示那么多就可以了，主要是为了填补柱子下面的空间，让硅胶柱是一个上下面粗细一致的圆柱形。

装柱子过程不在这里赘述，装好柱子后，上样品，注意用吸管小心翼翼，沿着柱壁绕圈，均匀上样，尽量不要弄坏硅胶表面。样品倒入后，让样品靠重力完全渗入硅胶，最后再随意倒入一些石英砂在最上面。这主要是为了保护已经上样完成的硅胶表面，这样以后再倒溶剂时，就不用担心破坏上层硅胶表面的平整了。