Question

基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选

基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是--G↓GATCC--;，限制酶II的识别序列和切点是--↓GATC--。根据图示判断下列操作正确的是：
A．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割
B．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割
C．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割
D．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割
限制酶1和限制酶2是怎么切详细的说下，我怎么感觉好像没有区别，为什么限制酶2会破坏标记基因，限制酶1不会？

Answer 1

识别序列有区别--G↓GATCC--限制酶1,2都可以切，但是--↓GATC--只能有酶2切。懂了么，就是说酶一要识别出6个碱基这样的排序才能切，但是酶二只需要识别出4个这样的排序，酶二的选择性比较低。然后，请给我题目里的那张图~是否在标记基因中存在GATC的序列呢，如果有，酶二会去把他切断，所以就会破坏标记基因了。

追问

能写长点吗。后面切法1和2是一样的吗？

追答

切法是一样的都是从G左侧切开，但是2可以切开这样的序列--C↓GATCC-，--A↓GATCC---T↓GATCA--G↓GATCT-，就是这么回事。。不懂的请继续追问

追问

但是就是说切割GGATCC的时候效果是一样的？题目给出的序列不是一直GGATCCTAGG这样循环下去的吗。。。？然后标记Gene1是GATC GATC 不会被限制酶1切是吗。

追答

是的切GGATCC的时候效果是一样的，题目并没有说循环。只有两个位点。Gene1不会被酶1酶切，你的回答很正确，说明你已经懂了，如果用酶二，那么两个基因都会被破坏，就没有标记基因了。