Question

质粒酶切前后电泳结果有什么不同

Answer 1

如果是单酶切，超螺旋质粒会变成开链DNA，开链的DNA在凝胶中泳动速度慢于超螺旋质粒，因此条带会偏大，这是酶切充分的情况。如果不充分，就会有大小有差距的几条带；

如果是双酶切，而且片段大小适中，可以看见酶切的片段和载体，还有未切开的质粒。

能不能区分超螺旋质粒和开链质粒，和所用琼脂糖凝胶的浓度，电泳时间，DNA纯度有关。试着延长跑胶的时间，应当是有区别的。酶切之前就有几条带，可能是因为质粒样品中有杂带，来源于杂菌或者降解。

扩展资料：

质粒是细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体（或拟核）以外的DNA分子，存在于细胞质中（但酵母除外，酵母的2 μm质粒存在于细胞核中），具有自主复制能力，使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数，并表达所携带的遗传信息，是闭合环状的双链DNA分子。

质粒不是细菌生长繁殖所必需的物质，可自行丢失或人工处理而消除，如高温、紫外线等。质粒携带的遗传信息能赋予宿主菌某些生物学性状，有利于细菌在特定的环境条件下生存。

根据质粒在细菌内的复制类型可分为两类：严紧控制型和松弛控制型。

严紧控制复制型质粒的复制酶系与染色体DNA复制共用，只能在细胞周期的一定阶段进行复制，当细胞染色体停止复制时，质粒也就不再复制。

松弛控制复制型的质粒的复制酶系不受染色体DNA复制酶系的影响，在整个细胞生长周期中随时都可以复制，在染色体复制已经停止时质粒仍能继续复制。

参考资料来源：百度百科——质粒

Answer 2

酶切前，质粒电泳图一般是三条条带，并认为这三条带从上到下一次是线性、开环、超螺旋。其实可能会比这条带更多些，可以认为是中间复合体状态。
酶切后，因为超螺旋状态的质粒被切成线性，所以条带会有一条条带。如果是双酶切，或是质粒上的酶切位点比较多的话，会有两条或更多条带。

Answer 3

如果是单酶切，超螺旋质粒会变成开链DNA，开链的DNA在凝胶中泳动速度慢于超螺旋质粒，因此条带会偏大，这是酶切充分的情况。如果不充分，就会有大小有差距的几条带；
如果是双酶切，而且片段大小适中，可以看见酶切的片段和载体，还有未切开的质粒。

追问

但我们老师说，单酶切后被切断的质粒DNA构型相同，所以酶切后只会显示一条带~这就是你说的偏大的那条？ 为什么质粒酶切前的电泳结果会出现几条带？

追答

能不能区分超螺旋质粒和开链质粒，和你所用琼脂糖凝胶的浓度，电泳时间，DNA纯度有关。试着延长跑胶的时间，应当是有区别的。
酶切之前就有几条带，可能是因为质粒样品中有杂带，来源于杂菌或者降解。

Answer 4

酶切前由于是环状的，电泳率较高；
酶切后由于DNA结构变成直链，阻力变大，电泳率变低，就跑的不如环状质粒那么快了