目的基因与标记基因产物
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目的基因是需要表达的基因,标哗山肢记基因是有一定特点的基因
当人们想利用某些细菌产生某些物乱世质时,会先提取目的基因,然后让目的基因与运载体结合,再将目的基因导入受体细胞,最后培养细胞进行表达.
标记基因就是在导入受体细胞时导入进取的人类的已知作用的基因,目的是为检测目的基因是否成功导入.
由于一般都是有"鸟枪法"导入的目的基因,所以成功率并不是很高,目的基因的检测和筛选就显得很有必要.
例如:大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因,当这种质粒与外源dna组合在一起形成重组质粒,并被转入受体细胞后唯坦,就可以根据受体是否吸饱具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得了目的基因.当人们用选择培养基(比如含有青霉素的培养基),来培养受体细胞时,能够在培养基中存活下来的受体细胞就可以认为是成功的导入了外源dna,标记基因就起作用了.
当人们想利用某些细菌产生某些物乱世质时,会先提取目的基因,然后让目的基因与运载体结合,再将目的基因导入受体细胞,最后培养细胞进行表达.
标记基因就是在导入受体细胞时导入进取的人类的已知作用的基因,目的是为检测目的基因是否成功导入.
由于一般都是有"鸟枪法"导入的目的基因,所以成功率并不是很高,目的基因的检测和筛选就显得很有必要.
例如:大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因,当这种质粒与外源dna组合在一起形成重组质粒,并被转入受体细胞后唯坦,就可以根据受体是否吸饱具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得了目的基因.当人们用选择培养基(比如含有青霉素的培养基),来培养受体细胞时,能够在培养基中存活下来的受体细胞就可以认为是成功的导入了外源dna,标记基因就起作用了.
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看你的描述,表达的应该不租毕老是融合基因。
标记基因的产物不数明会影响到目的弊升基因产物的表达。因为做瞬时表达的时候,会用空载体或是不加诱导剂的处理作对照,最后电泳的时候标记基因的产物和其他蛋白一样在实验组和对照组之间没有差异,有差异的带才是目的基因的产物。
回补充问题:目的基因与标记基因的产物当然是混在一起的,表达所用的菌株自身的代谢产物也混在里面,这些不影响,你要检测的是目的蛋白,是在这个混合物里面的差异蛋白。
如果你讲的是转基因的话,标记基因在转基因受体里面根本不会表达,因为质粒上标记基因的启动子应该是原核生物的启动子,受体一般都是真核生物,目的基因也要连上启动子才可以表达。
标记基因的产物不数明会影响到目的弊升基因产物的表达。因为做瞬时表达的时候,会用空载体或是不加诱导剂的处理作对照,最后电泳的时候标记基因的产物和其他蛋白一样在实验组和对照组之间没有差异,有差异的带才是目的基因的产物。
回补充问题:目的基因与标记基因的产物当然是混在一起的,表达所用的菌株自身的代谢产物也混在里面,这些不影响,你要检测的是目的蛋白,是在这个混合物里面的差异蛋白。
如果你讲的是转基因的话,标记基因在转基因受体里面根本不会表达,因为质粒上标记基因的启动子应该是原核生物的启动子,受体一般都是真核生物,目的基因也要连上启动子才可以表达。
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