新冠病毒检测,为何一会阴性,一会阳性?
新冠肺炎疫情发生已经快4个月了,中国疫情已经控制住了,但还有少数病人出院后的复检结果又是阳性。这是为什么呢?这部分人会不会再传染别人了呢?
按照第六版之前的出院标准,经过治疗后,体温恢复正常3天以上,呼吸道症状明显好转,肺部影响学显示急性渗出性病变明显改善,连续两次呼吸道标本核酸检测阴性(采样时间至少间隔1天)。满足以上条件,可解除隔离出院。问题出在哪里呢?
原因之一:检测方法本身可能存在问题这些患者出院前的检测结果为阴性,复检又是阳性,情况说明病毒并没有完全清除,之前的两次阴性不是真正的阴性,是假阴性,上呼吸道的咽拭子未必能反映病毒的实际情况。为什么会是假阴性?
目前采用的定量PCR的方法,其实对操作人员的技术要求比较高,样本准备或者说采样,是可能引起假阴性的重要一步。
采的是患者的咽拭子和痰液样本,检测新型冠状病毒(2019-nCoV) ORF1ab基因、N基因和E基因等三个基因。
从咽部和扁桃体取分泌物作细菌培养或病毒分离。如何采?在过分依赖核酸检测技术的同时,很大程度上忽略了采样这一最重要的步骤。样本采集不当,并未采集到合理位置的标本,病毒含量不能反映真实状况。
正常操作:张开嘴巴,暴露咽喉,用培养管内的消毒长棉签以灵敏而轻柔的动作擦拭两侧腭弓和咽、扁桃体上的分泌物。然后将棉签插入试管,及时送检。关键步骤是擦拭,而不是蘸一下或者点一下就完了。
咽拭子的取样是非常非常关键的步骤!换句话说,如果取样不对,大概率是检测不到病毒的,或者说不同的医生取样,得到的结果有可能是相反的。
整个操作与检测过程中,假阴性的产生原因还有以下几点:1、样本保存和处理不当,造成处理过程中病毒RNA降解。2、提取效率低,病毒并未完全提取,或提取过程中病毒降解。3、检测分辨率低,检测下限过高,导致无法检出病毒。由此可见,无论是RT-qPCR检测步骤,还是检测之前的采样步骤,都要最大程度的避免产生假阴性。
另一个可能的原因与病毒复制的周期有关。病人在医院抗病毒治疗,并逐渐好转过程中,病毒载量会下降,当下降到一定程度的时候,是很可能测不到的。而且,人与病毒共生的可能性也是存在的,这也是之前卫生部专家提到的,新冠病毒与人长期共存的情况有可能存在。而病毒是否活跃,主要取决于人的免疫情况。这个道理有点像乙肝病毒,持续用药转阴了,但是并不代表完全清除了病毒。
这些人出院后,还会再感染吗?
理论上,这部分经过病毒感侵染,医院封闭治疗,病毒载量降低,体内已经产生较高的新冠病毒抗体IgG,在人体正常的免疫能力下,再次感染的可能性非常小。
这些患者还具有传染性吗?临床中发现,符合国家诊疗方案解除隔离标准的患者,在出院后8天左右,家属有确诊的情况。患者体内核酸成阳性,可以理解为体内还有病毒存在,对于患者自身而言,可能不会再感染,但是对于密切接触者,却是一个潜在传染源。对于疫情控制而言,假阴性的结果比假阳性更可怕,也就是说,一个人本身已被感染,检测结果却是阴性,达不到收治条件,任由其自由活动,才是最大的传染源。对于一种新发传染病,宁可严格一点。
这种情况,应该怎么办?
首先,出院标准还是应该再严格一些。在刚刚发布的《新冠诊疗方案第七版》,在出院标准上也较第六版有了更明确的要求,即此前要求做两次呼吸道标本核酸检测,现在明确为两次痰、鼻咽拭子等呼吸等标本核酸检测。这样其实能减少鼻咽拭子采样不到位造成的假阳性。
其次,出院后,应该继续隔离14天。第七版中也删除了“解除隔离”的说法。在未明确是否还具有传染性的时候,从控制疾病传播的角度,删除“解除隔离”的做法是明智的。目前武汉要求出院患者到隔离点进行两周的隔离,减少复阳造成传染的可能风险。
第三,尝试增加采样点
比如上海等城市,需要检测肛拭子,肛拭子(粪便)核酸检测为阴性才可出院。他表示,由于上海的出院标准较《诊疗方案》更加严格,到目前为止,上海出院患者未出现一例核酸转阳。
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原因有三个,第一个和检测技术并不能100%正确有关,第2个和取样不一定能够取到含病毒的样品有关,第3个和病人自身的病毒含量有关。
01、检测技术还不够成熟。因为新型冠状病毒实在是太新了,所以现阶段全世界各国各地的检测技术都是不够成熟的,基本上没有哪家机构敢说自己的检测成果100%正确,因为他们做不到,也不敢保证。
在这种情况下,一般对新冠病毒的检测都是同时进行多次检测的,因为假设检测一次结果错误的几率是30%,那么检测两次错误的几率并不是15%,而是30%×30%=9%。
把这个数据模型带入到我国型冠状病毒检测试剂的错误率4%中,可以得到两次检测的错误率为0.16%的结果,因为这个几率已经足够低,所以大部分地区的出院标准都是按照两次检测的结果判断的,大部分情况下检测两次没问题的基本上都不会有问题。
但是这些都是概率学上的东西,现实肯定是比概率要更加魔幻的,要不然怎么会有一些人第1次买彩票就中了五百万,只要正确率不是100%,有时候出现一些问题是在所难免的。
02、样品采集流程错误就会采集不到含病毒的样品。对于样品采集,现行的标准是用咽拭子进行采集,具体的操作流程是把两个类似于棉签的东西伸进你的喉咙,在指定的位置来回擦拭两遍,只有这样才能够采集到含有病毒的样品。
可是有很多人并没有按照规定的流程来操作,他们没有来回擦两遍,而是碰一下滚一下就出来了,这样操作会导致被采集者身上有病毒,但是错误的操作手法导致没有采集到病毒的情况出现。
按照理论,连续做两次的错误率是0.16%,但是其中有一次是无效的,实际上只检测了一次的错误率是4%,只要有一次无效,直接把检查的错误率从0.16%提升到了4%,整整提高了25倍,由此见得采集流程不规范对检测结果的正确是致命的。
03、病人体内的病毒含量不是恒定的。简单来说就是病人体内的病毒会因为治疗效果的产生而下降,它可能下降到一个用各种技术都检测不到的程度,但它仍然存在患者的身体里面。
这也是为什么现在的出院规定里面,不但要求做两次试剂检测,更要求在出院前隔离7天观察,出院后隔离14天观察的原因。
这可能患者刚刚被病毒感染时,由于这时体内没有足够多的病毒以供检测,就会出现“假阴性”情况。 而后病情加重后,能检测出更多病毒,就出现阳性了。