Question

求助：普通光学显微镜就可以鉴定细菌的方法

请问有没有一个只需要普通光学显微镜（不需要显微镜最好）就可以鉴定细菌的方法？谢谢
我的情况是这样的，先用琼脂平板计数法采集、培养细菌，现在需要对菌落鉴定，但实验室没有高倍的显微镜

Answer 1

显微镜观察的话最好的方法就是染色观察了，对于鉴别一些基本特性的细菌很有帮助。
基本步骤是：涂片用的载玻片需用清洁液洗净、擦干、不留油质，否则培养物不能均匀地推开。被检材料如果是肉汤培养物，用铂金耳环取一滴，均匀涂抹于载玻片上，涂抹的范围约有手指甲大即可。随后，在酒精灯火焰上加热使之固定（即火焰固定）；被检材料如果是固体培养物，先滴一滴水（常用生理盐水）于载玻片上，用铂金耳环取少许培养物，在水滴中混匀，培养物不宜太多，菌体看不清楚。脓汁、淋巴液、乳汁也按同样方法制备抹片。血液和病变组织，直接涂抹在载玻片上，组织抹片也不能太厚，否则看不见细菌，细菌培养物抹片用火焰固定，组织抹片常用甲醇或甲醛固定。下面是几种常用的染色法：
(1) 革兰氏染色法：
① 在已干燥、固定好的抹片上，滴加草酸铵结晶紫染色液，经1－2分钟，水洗；
② 加革兰氏碘溶液于抹片上，作用1－3分钟，水洗；
③ 加95%的酒精于抹片上脱色，约30秒－1分钟，水洗；
④ 加稀释石炭酸复红（或沙黄水溶液）复染10－30小时，水洗；
⑤ 吸干或自然干燥，镜检。革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色。
(2) 美蓝染色法：在已干燥、固定好的抹片上，滴加适量的（足够覆盖涂抹点即可）美蓝染色液，经1－2分钟，水洗，干燥（可用吸水纸吸干，或自然干燥，但不能烤干），镜检。荚膜呈红色，菌体呈蓝色，异染颗粒呈淡紫红色。
(3) 萋－尼（Ziehl － Neelsen）氏抗酸染色法：首先在已干燥、固定好的抹片上，滴加较多量的石炭酸复红染色液，在玻片下以酒精灯火焰微微加热至发生蒸气为度（不要煮沸），维持微微发生蒸气，经3－5分钟，水洗。然后用3％盐酸酒精脱色，至标本无色脱出为止，充分水洗。再用碱性美蓝染色液复染约1分钟，水洗。最后吸干、镜检。抗酸性细菌呈红色，非抗酸性细菌呈蓝色。
(4) 姬姆萨氏染色法：于5ml新煮过的中性蒸馏水中滴加5－10滴姬姆萨氏染液原液，即成为常用的姬姆萨染色液。抹片经甲醇固定（一般需2－3分钟），干燥后，在其上滴加足量染色液，或将抹片浸入盛有染色液的染色缸中，染色30分钟，或者数小时至24小时，取出水洗，吸干或烘干，镜检。荚膜呈淡紫色，菌体呈蓝色，视野常呈红色。
(5) 鞭毛染色法
刘荣标氏鞭毛染色法：
染色液：甲液：5％碳酸溶液　　　　 10ml
鞣酸粉末　　　　　　2g
饱和钾明矾水溶液　　10ml
乙液：饱和结晶紫或龙胆紫酒精溶液
用时取甲液10份，乙液1份，混合后在冰箱中可保存7个月。在干燥、固定好的抹片上，滴加上述混合液，在室温中染色2－3分钟，水洗，干后镜检。菌体和鞭毛均呈紫色。
(6) 芽胞染色法
复红、美蓝染色法：抹片经火焰固定后，滴加石炭酸复红液于片上，加热至产生蒸气，经2－5分钟，水洗，以5％醋酸褪色，至淡红色为止，水洗；以骆氏美蓝液复染半分钟，水洗；吸干或烘干，镜检。菌体为蓝色，芽胞呈红色。
孔雀绿、沙黄染色法：抹片经火焰固定后，滴加5%孔雀绿水溶液于其上，加热30－60秒，使生蒸气3－4次，水洗半分钟，以0.5％沙黄水溶液复染半分钟；水洗，吸干，镜检。菌体呈红色，芽胞呈绿色（酸处理过的玻片，可防止绿色褪失）。
希望这些对你有用！

Answer 2

普通的细菌培养，就是在普通光学显微镜观察下，分辨被培养的细菌对试剂的耐受性来鉴别常见细菌的方法。

Answer 3

您的鉴定需要到什么水平？
使用DNA barcoding的方法可以有效的鉴定。
优点是不用形态观察（当然不用显微镜），不需要分类学基础，鉴定结果相对客观；
缺点是要提DNA、扩增、测序和分析，要花一些钱和时间，结果对公共数据库的信息量有较大依赖（可能仅能鉴定出常见种，或者鉴定到某个种上水平）——如果您的实验室不做相关的分子实验，那么对于您来说，做这些可不如找一个“高倍显微镜”更容易。

Answer 4

可以的。看有没有细胞核。

追问

什么方法？能不能说的详细点

追答

用显微镜观察，看如果没有细胞核，就是细菌。

追问

您好像搞错了吧。。。我要问的是细菌鉴定方法，可您回答的是判断是不是细菌。。。
您最好先搞清什么事细菌鉴定吧。。。