简述限制性核酸内切酶出现星活性的原因。

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【答案】:限制性内切酶的星活性是指限制性内切酶在非标准反应条件下,能够切割一些与其特异识别顺序类似的序列。
星活性的出现的原因有:①高甘油含量(>5%,V/V);②内切酶用量过大(>100U/μg DNA);③低离子强度(<25mmol/L);④高pH值(pH8.0);⑤含有有机溶剂,如DMSO、乙醇等;⑥非Mg2+的二价阳离子存在,如Mn2+、Cu2+、Zn2+等。
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