Question

如何提高半定量RT PCR结果的可靠性

Answer 1

总结我所做的RT-PCR的经验，提高半定量RT-PCR的可靠性或重复性需要注意的几点：
1. 提取RNA前确保样品的正确保存，不能有降解。
2. 提高RNA的过程中避免RNA酶的污染引起RNA部分降解。
3. 提取的RNA需要保证无基因组DNA的污染，因此半定量PCR时需要设置对照组。
4. 保证反转录的效率。
5. RT-PCR需要做几个重复孔，避免加样的误差。
6. 所用的内参是否合适，因为管家基因的表达量只是相对保守，但视不同的处理方式会有变化。
希望能帮到你，有什么问题互相交流，望采纳！