Question

有关表达大分子量蛋白质粒构建的问题 有个长度约7kb的片段，想要构建表达质粒，请问应该怎么做？

就是一般大分子好像质粒都构不出来的，有什么特别适合的载体或者实验方法吗？

Answer 1

首先，要知道你的片段是来自哪种菌？真菌还是细菌，是那种？
至于特别适合的方法，那需要尝试和摸索的，每个实验室都有自己熟悉的一套技术的，藏着不让别人轻易知道，别的实验室也做不了，哎，这也是实验室的通病。
找到合适的表达体系是需要时间和运气的，你多尝试吧。
然后，你还是多看看文献，查查你实验室有的体系别人有没有成功的，主要看sci的，中文的就算了。
只能帮你到这了。

Answer 2

7kb确实有点大，一般的基因都只有3kb左右的，这个你可以分别查看常用质粒的说明，看看最大容纳量是多少，主要是看细胞或细菌能不能承受，如果不能就没办法，如果能承受，构建问题就不大

Answer 3

那就找个2-4kb的小载体，把片段当成载体，把载体当成片段，进行连接。