Question

下列有关限制性核酸内切酶的叙述中正确的是 （ ）

下列有关限制性核酸内切酶的叙述中正确的是 （ ）
A．用限制性核酸内切酶切割一个DNA分子中部，获得一个目的基因时，被水解的磷酸二酯键有2个
B．限制性核酸内切酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越大
C．-CATG↓-和-G↓GATCC-序列被限制酶切出的粘性末端碱基数不同
D．只有用相同的限制性核酸内切酶处理含目的基因的片段和质粒，才能形成重组质粒

Answer 1

答案：B

解析：一个DNA分子两股链（two strands），每股链的核苷酸之间用3‘,5’-磷酸二酯键连接，获得中间的目的序列需要两个切割位点，共有4个磷酸二酯键被打开，故A错；C中序列酶切结果分别是：

每个粘性末端碱基数都为4个，故C错；大家都知道，平末端可以在末端转移酶作用下产生粘性末端，换句话说，产生平末端的限制性核酸内切酶B切割得到的目的基因片段（或质粒）经其他处理后，可以和产生粘末端的限制性核酸内切酶C处理的质粒（或目的基因片段）形成重组质粒，D错；不考虑碱基偏爱性，4核苷酸序列在DNA链中出现频率较高，对一随机排列的DNA分子来说，理论值为1/(4^4)，而对于5和6核苷酸识别序列出现频率较低，分别为1/(4^5)和1/(4^6)，B对。

Answer 2

双链DNA 是其识别对象 ，所以破坏两个键
限制性内切酶一般识别6-8个 太短限制性就没意义了
无法判断数目
同尾酶也能连接

Answer 3

A：用限制性核酸内切酶切割一个DNA分子中部，获得一个目的基因时，被水解的磷酸二酯键有4个B：限制性核酸内切酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越大。不一定，要是DNA没有你所谓的短的序列呢？就算有，那只有一个呢？
C：有可能相同，也有可能不同，这要看-CATG↓-连着的基因。
D是对的。

追问

为什么“被水解的磷酸二酯键有4个”？“这要看-CATG↓-连着的基因”？？