观察线粒体时为什么使用健那绿染液染色？
原理：线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态(即有色状态)呈蓝绿色，而在周围的细胞质中染料被还原，成为无色状态，从而方便观察。
线粒体是一种存在于大多数细胞中的由两层膜包被的细胞器，是细胞中制造能量的结构，是细胞进行有氧呼吸的主要场所，被称为"power house"。其直径在0.5到1.0微米左右。
除了溶组织内阿米巴、篮氏贾第鞭毛虫以及几种微孢子虫外，大多数真核细胞或多或少都拥有线粒体，但它们各自拥有的线粒体在大小、数量及外观等方面上都有所不同。
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观察实验的注意事项：
1．整个操作过程为保证线粒体的完整，应尽量使操作时的环境如温度（0—4℃），pH (7.0左右）保持恒定，同时尽可能短操作时间。
2．组培细胞消化时要特别小心，防止损失或反复。
3．匀浆时，所用的介质一定是等渗缓冲液，常用的有0.25 mol/L蔗糖溶液或生理盐水代替Hank’s液
4．匀浆次数依照匀浆器的松紧而定，次数过少，细胞破损不完全，就会影响线粒体产量。
5．所以取2/3上清夜用来制备线粒体是为防止细胞碎片过多影响观察。
6．整个分离过程，一般最好在30—60分钟内完成，不宜过长。
参考资料来源：百度百科-健那绿
因为健那绿染液可使线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色，以在高倍显微镜下观察线粒体分布和形态。其原理是线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态(即有色状态)呈蓝绿色,而在周围的细胞质中染料被还原,成为无色状态。
健那绿染液配置方法：以4-氨基-N, N-二乙基苯胺或对苯二胺（含N, N-二乙基苯胺）为起始原料，在氧化剂存在的条件下，与苯胺环合，得到亚甲基紫3RAX，随后，经过重氮化和偶合反应制备健那绿B。
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线粒体的结构：
线粒体由外至内可划分为线粒体外膜、线粒体膜间隙、线粒体内膜和线粒体基质四个功能区。处于线粒体外侧的膜彼此平行，都是典型的单位膜。
其中，线粒体外膜较光滑，起细胞器界膜的作用；线粒体内膜则向内皱褶形成线粒体嵴，负担更多的生化反应。这两层膜将线粒体分出两个区室，位于两层线粒体膜之间的是线粒体膜间隙，被线粒体内膜包裹的是线粒体基质。
参考资料来源：百度百科——健那绿
2.高倍镜下,叶绿体随着光照强度和方向的改变,表现出一定的趋光性,叶绿体缓慢向光照方向移动集中
健那绿染液是专一性的活细胞染料，线粒体细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态（即有色状态）呈蓝绿色，而在周围的细胞质中染料被还原成为无色状态，因此可以使活细胞的线粒体呈现蓝绿色。而细胞质接近无色。线粒体能在健那绿染液中维持活性数小时，通过染色，可以在高倍显微镜下观察到生活状态的线粒体的形态和分布。
