文献中常有western blot和免疫沉淀结合在一起做的图,可是在下看不同,请帮忙看看这种图怎么看呀?

还有... 还有 展开
excalibur0510
2013-02-05 · TA获得超过156个赞
知道答主
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图顶部的“+”和“-”分别代表是否表达载体蛋白以及载体蛋白的相关信息;

一般标有"TCL" "WCL" "Lysates"或"IB:**"代表了对相对应过表达载体的表达情况的检测(如果没有表达那么免疫沉淀就白做了)"Anti-**"和"IB:**"里的“**”则是显出条带的抗体,一般与过表达载体的标签对应,比如“HA”或者“Myc”,“GFP”等等,比如第一个图中,用HA的抗体显出了1、3、4泳道带HA标签的ROCK2,说明ROCK2有表达;

 

最重要的就是剩下的IP图了,IP图一般都有两个,一个用来说明沉淀下来了蛋白1,另一个图用来说明沉淀下来了与蛋白1存在相互作用的蛋白2。以第一个图说明,“IP:Anti-Myc”是说沉淀蛋白1用的抗体是“Myc”,因此带myc标签的mDpr2作为蛋白1被沉淀下来,跑胶后用myc的抗体显出了条带,同一块胶转的膜再用HA的抗体可显出与蛋白1有相互作用,一同被沉淀下来的蛋白2,因此图1表示ROCK2与mDpr2存在相互作用。

 

有什么不懂的还可以问我,谢谢!

追问
我明白啦,谢谢啦!!!
追答
不客气~O(∩_∩)O~
11
2024-08-28 广告
western blot结果的分析是一个主观性比较强的过程western是一个半定量的实验。 所以一般是作为定性的验证试验首先要分析的就是有无目的蛋白的条带,有无条带就是一个定性的结果,这种分析是比较简单。当然这其中还要综合考虑内参等对照样... 点击进入详情页
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