Question

生物关于限制性核酸内切酶

如图，为什么可以只用EcoR1 与Sau3A1 酶切，这样不才只有3个切点吗？不是要有4个切点才能这个目的基因才能与分离这个DNA链不是吗？

Answer 1

首先，限制性核酸内切酶的切点是指能把DNA双链切断，在高中生物中，基因工程里用同一种限制性核酸内切酶切取目的基因和切分质粒；若在复杂些，可用两种限制性核酸内切酶，用两种切取目的基因（为了使切下的目的基因头尾不自我粘连），用其中一种切断质粒。
该图中，只显示了目的基因附近的酶切点，而没有质粒的；按照你提供的答案“只用EcoR1 与Sau3A1 酶切”，可作如下推测：题目中质粒上只有EcoR1的酶切点，为了不让切下的目的基因头尾不自我粘连，需用另外一种酶切取目的基因一侧，这里Sau3A1和Bg1Ⅱ应该都能用。
只是推测，还是要看题目的，有问题可以再问。

追问

帮忙解释一下3L的追问，另外加一句你的推测是对的

追答

限制性核酸内切酶识别特定的碱基序列后，只切取3‘5‘磷酸二酯键，但效果有两种，如果把DNA竖着放，一种是平的的，一种是”之“字形的，前者只切取3‘5‘磷酸二酯键没问题，后者切取3‘5‘磷酸二酯键后，两错位切点之间的氢键不足以连接两多核甘酸链，故断裂。
另外，你的问题我了解，题目中图上只标了酶切大致位置，其实把图放大，一个限制性核酸内切酶的识别序列就像3L的图一样，两侧都有切点的。

追问

不好意思 分已经给别人了。那我能再问你一个问题吗，限制性核酸内切酶 是像图3那样切的
所以 限制性核酸内切酶 选的一定要是切目的基因两侧的是吗？

追答

没事，解决了问题就好~
限制酶在题目中的图上是大致位置，回答中的图是切点位置，前者的一个点，对应后者的两个点；在题中的图中，目的基因的两边都要有切点，否则目的基因无法切下。

追问

嗯 谢谢你了

追答

不客气~

Answer 2

目的基因只要两头有就行啊
就像用刀把它切下来
不懂追问

追问

DNA链不是双链吗？这些都只能切 磷酸二酯键 如果就这样切2下 最多只能将1条DNA链上的碱基切下，所以难道不是要4个切点吗？

追答

好吧，那我这么解释。一个切点，就是一刀直接切断双链，也就是切两个磷酸二酯键。
请采纳

追问

但是通常限制性核酸内切酶

都是这样表示的这就说明它只是切一条链

追答

你翻翻书吧…我怎么说了你还不信。他只是切特定序列，DNA双螺旋是平行倒置，可以切上面的…反过来也可以切下面的啊。

追问

谢谢

追答

没事。

Answer 3

目的基因俩侧各有一个切点即可，只用EcoR1 会形成环状DNA。