Question

我想问一下荧光定量PCR法用2-△△Ct计算相对定量的问题

结果出来的都是多少多少倍数，而且对照组又设的是1，这该怎样进行统计啊，我看人家的表都是x¯±s形式的，怎么才能弄出这样的形式啊，麻烦能不能给我举个例子详细说一下啊，或者发到我邮箱：674904291@qq.com

Answer 1

做了一个实验，内部参考电压可以得到几个CT值，会得到多个目标基因。在这种情况下，根据CT值的平均值，将得到的比率（相对量）。

实验肯定不是唯一的一次，至少重复3次。这将是一个倍数的3个或更多，得到。 3个以上的值，你可以计算平均值和标准偏差的。

Answer 2

你一次实验做的数据，内参可以得到几个CT值，目的基因也会得到几个。这样的话，根据平均的CT值，就会得到一个倍数(相对量)。
实验肯定不会只做一次吧，至少重复3次以上。这样就会得到3个以上的倍数了。3个以上的数值就可以算均数和标准差了。

Answer 3

三次独立实验，每次至少三个重复，统计结果自然就是那样了。

追问

我想问一下，三次重复之后实验组都是多少多少倍的，可是对照组呢还是设的都是1啊，那做统计分析比如t检验的话，那不能用实验组的数据和1做检验吧，我就是这不太懂，对照组的1怎么做检验啊

追答

一般而言对照应该是组成型表达的看家基因或16s rRNA基因。你要观察的是其他某个或某几个基因在条件变化前后的变化。比如A基因在两种条件下（B，C）的表达情况，得到的应该是A基因的两组数据，你要统计分析的是A基因的结果（数据x¯B±s与x¯C±s）是否具有显著性，而不是参考基因的结果（数据1）。希望我说明白了，能有所帮助。