细胞转染目的,转染成功证明什么?有什么意义
细胞转染是指将外源分子如DNA,RNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。
细胞转染技术有助于研究和控制真核细胞基因功能。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中,其应用越来越广泛。随着基因与蛋白功能研究的深入,转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。
扩展资料:
转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例;化学介导方法很多,如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术;生物介导方法,有较为原始的原生质体转染,和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。
理想细胞转染方法,应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。病毒介导的转染技术,是目前转染效率最高的方法,同时具有细胞毒性很低的优势。但是,病毒转染方法的准备程序复杂,常常对细胞类型有很强的选择性,在一般实验室中很难普及。其它物理和化学介导的转染方法,则各有其特点。
需要指出的一点,无论采用哪种转染技术,要获得最优的转染结果,可能都需要对转染条件进行优化。影响转染效率的因素很多,从细胞类型、细胞培养条件和细胞生长状态,到转染方法的操作细节,都需要考虑。
参考资料:百度百科-细胞转染
细胞转染是指将外源分子如DNA,RNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。
阳离子脂质体表面带正电荷,能与核酸的磷酸根通过静电作用,将DNA分子包裹入内,形成DNA脂复合物,也能被表面带负电的细胞膜吸附。
再通过融合或细胞内吞进入细胞。脂质体转染适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中,是目前实验室最方便的转染方法之一,其转染率较高。
扩展资料:
理想细胞转染方法,应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。病毒介导的转染技术,是目前转染效率最高的方法,同时具有细胞毒性很低的优势。但是,病毒转染方法的准备程序复杂,常常对细胞类型有很强的选择性,在一般实验室中很难普及。其它物理和化学介导的转染方法,则各有其特点。
需要指出的一点,无论采用哪种转染技术,要获得最优的转染结果,可能都需要对转染条件进行优化。影响转染效率的因素很多,从细胞类型、细胞培养条件和细胞生长状态,到转染方法的操作细节,都需要考虑。
参考资料来源:百度百科-细胞转染
转染一般是将目的基因构建到某个载体,将构建好的重组质粒导入细胞中,这样就能表达你所要的目的蛋白用于后续实验。转染可以得到细胞中本身不表达的蛋白或是能提高某些蛋白表达量。
DNA与转染试剂孵育的目的:DNA和转染试剂结合形成DNA-转染剂复合物。
DNA-转染剂复合物与细胞孵育的目的:细胞吸收DNA-转染剂复合物,进而DNA进入细胞。
扩展资料:
转染72 小时后按1:10 的比例将转染细胞在6 孔板中传代,换为含预试验中确定的抗生素浓度的选择培养基。在6 孔板内可见单个细胞,继续培养可见单个细胞分裂繁殖形成单个抗性集落,此时可用两种方法挑选单克隆。
有限稀释法:将细胞消化下来后做连续的10 倍稀释(10-2—10-10),将每一稀释度的细胞滴加到96 孔板中培养,7-10 天后,选择单个克隆生长的孔再一次进行克隆。
参考资料来源:百度百科-转染
还是不懂,这有啥意义啊?转染成功证明能放进去,并且知道能放到哪个位置是吗?只是定位用吗?要了解什么东西才用到转染这个方法呢?也就是它的应用是啥???
你不是学生物的吧。。。。转染就是把质粒片段转进细胞进行表达啊 或者一些短片段转进去直接起作用的