Question

构建miRNA荧光素酶报告基因载体

想验证一个蛋白A对miRNA B 转录的影响，需要构建miR的荧光素酶报告基因载体，选用的pGL3-basic，请问是选取pre-miR基因序列呢还是选用miR的启动子序列？内切酶应该如何选择？

Answer 1

pGL3-basic是检测启动子的荧光报告载体，当然是将miR的启动子序列构建上去。
内切酶按照你基因和多克隆位点的序列来选择。

追问

那内切酶是按照具体的基因序列和酶切点一点一点比对吗？

追答

是的。
但有专门的软件可以自动查找。