双缩脲法测蛋白质含量实验调零的目的是什么
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目的是学习蛋白质含量测定的原理和方法。
双缩脲法测定蛋白质含量实验中,双缩脲是在大约180°C条件下加热两个尿素分子,以达到释放出一个氨分子而获得的产物。在强碱性溶液中,缩二脲和硫酸铜形成紫色络合物,称为缩二脲反应。任何包含两个酰胺基或两个直接连接的肽键或可以通过中间碳原子连接的肽键的化合物都将发生缩二脲反应。
紫色复合色的强度与蛋白质浓度成正比,与蛋白质分子量和氨基酸组成无关。它可以用来确定蛋白质含量。测量范围是1-10 mg蛋白质。干扰测定的主要物质是硫酸铵,Tris缓冲液和某些氨基酸。
这种方法的优点是速度快,不同的蛋白质产生相似的颜色,干扰物质少。主要缺点是灵敏度差。因此,缩二脲法通常不用于蛋白质的精确测定。
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