Question

用碱裂解法提取质粒DNA的,加入溶液1,容液2,容液3后各有哪些现象,原因是什么？

Answer 1

溶液2中的主要成分是NaOH和SDS，是用来裂解细胞的。因为NaOH遇到二氧化碳容易反应生成碳酸氢钙，影响使用效果，因此要现配现用。SDS的话，低温容易产生沉淀。不过在37°C 水浴一下就好。主要还是NaOH的问题。

溶液1主要是让菌体细胞充分悬浊于溶液，没有什么实际意义，可以不要。

溶液2是碱液，目的在彻底破坏细胞膜，释放核酸。

溶液3是酸性钾盐溶液，目的是中和碱性并且沉淀SDS同时被沉淀的还有蛋白和大片段线性DNA。

扩展资料：

人们使用碱与SDS裂解法从E. coli（大肠杆菌）中分离制备质粒DNA已有30多年的历史。将细菌悬浮液暴露于高pH值的强阴离子洗涤剂中，会使细胞壁破裂，染色体DNA和蛋白质变性，将质粒DNA释放到上清中。

尽管碱性溶剂使碱基配对完全破坏，闭环的质粒DNA双链仍不会彼此分离，这因为它们在拓扑学上是相互缠绕的。只要OH-处理的强度和时间不要太过，当pH值恢复到中性时，DNA双链就会再次形成。

参考资料来源：百度百科-质粒抽提