细胞内DNA复制的引物与PCR引物有何区别?
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2022-12-11 · 百度认证:北京惠企网络技术有限公司官方账号
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细胞内DNA复制的引物与PCR引物有何区别\x0d\x0a【相同点】:\x0d\x0a 1. 都以DNA为模板\x0d\x0a 2. 都以四种dNTP为底物\x0d\x0a 3. 都要DNA聚合酶\x0d\x0a 4.都需要Mg2+\x0d\x0a 5. 都需要解开双链为2条单链\x0d\x0a 6. 都沿着5‘-3’方向聚合\x0d\x0a【不同点】:\x0d\x0a 1. PCR是DNA复制的体外扩增技术\x0d\x0a 2. 体内DNA复制半不连续复制,体外PCR连续复制,不产生冈崎片段。\x0d\x0a 3. 体内DNA复制是8种酶和蛋白共同参与(dnaB,引物酶,rep蛋白,SSB蛋白,DNA旋转酶,DNA聚合酶3,DNA聚合酶1,连接酶),体内DNA复制的聚合酶在高温时会变性,PCR需要耐热的DNA聚合酶(常用TaqDNA聚合酶)。\x0d\x0a 4. 生物体内DNA复制需要生物体自身的复制,PCR需要经过高温变性,低温退火和中温延伸过程,要经历三十次循环使特定DNA片段放大数百万倍。\x0d\x0a 5. DNA复制需要校对以保证忠实性,PCR不需要校对。\x0d\x0a 6. 引物不同:体内DNA复制需要RNA,而且体内引物要除去,PCR需要两个人工合成的DNA引物,不需要切除。\x0d\x0a 7. PCR对DNA模板要求不高,纯度要求不严格,用量很低,但是引物的设计十分重要,决定了PCR扩增片段的大小和特异性。
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