Question

如何阐明某个蛋白的基因结构与功能?简述其研究方法与步骤。

Answer 1

【答案】：阐述某个蛋白质的基因结构：(1)用微量顺序仪测定该蛋白质的N-端30个氨基酸的序列；(2)按照遗传密码预测相应于氨基酸序列的mRNA核苷酸序列；(3)用快速固相化学合成法合成一系列短的DNA片段，15～20核苷酸长，它们能和mRNA的部分序列形成互补碱基对；(4)将这些短的DNA片段和细胞总的mRNA杂交，籍此可分离出所需要的mRNA；(5)将此mRNA进行体外翻译以验证是否为目的基因。确定该基因的功能可使用基因剔除或过量表达的方法。