Question

简述采用双波长分光光度法定量时，等吸收点波长的选择方法。

Answer 1

基本原理 由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中，激发样品中的荧光物质发出荧光，荧光经过滤过和反射后，被光电倍增管所接受，然后以图或数字的形式显示出来。 物质荧光的产生是由在通常状况下处于基态的物质分子吸收激发光后变为激发态, 这些处于激发态的分子是不稳定的,在返回基态的过程中将一部分的能量又以光的形式放出，从而产生荧光． 不同物质由于分子结构的不同,其激发态能级的分布具有各自不同的特征，这种特征反映在荧光上表现为各种物质都有其特征荧光激发和发射光谱；，因此可以用荧光激发和发射光谱的不同来定性地进行物质的鉴定。

Answer 2

【答案】：当混合样品中干扰组分的吸收光谱对待测组分的吸收光谱有影响时，可采用双波长分光光度法。干扰组分的吸收光谱有吸收峰时，可采用等吸收点法削除干扰。等吸收点法是指在干扰组分的吸收光谱上，选择两个适当的波长λ₁和λ₂，干扰组分在这两个波长处具有相等的吸光度，而待测组分对这两个波长的吸光度差值又足够大，以便有足够高的灵敏度。